长梗黄精多糖提取、分离纯化及其抗氧化性研究

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黄精(Rhizoma polygonti),又名老虎姜,系百合科(Liliaceae)黄精属(Polygonatum)多年生草本植物。福建、浙江、云南为其主要产区。黄精在福建有3种,主要分布在福建省三明市梅列区。为进一步开发利用这一资源,本项目以福建三明长梗黄精为原料,对其多糖提取、分离纯化工艺进行研究,最后利用果蝇体内抗氧化实验阐明其抗氧化活性,为深入研究长梗黄精多糖提供参考。(1)以梅列产的长梗黄精为原料,采用超声波辅助水提法,经优化获得最佳的提取工艺。由单因素实验结果确定液料比、提取温度、超声波作用功率和超声波处理时间各因素的优化参数,采用数据分析软件,通过响应面法分析结果获得各因素与长梗黄精多糖得率的交互关系。结果显示长梗黄精多糖优化后的提取工艺为:液料比17.81:1,超声波处理时间59.74 min,浸提的温度72.97℃,超声波作用功率152.85 W,所得的长梗黄精多糖的得率理论值16.6471%。经响应面模型验证,实际得率为16.59%,表明该模型可靠。(2)本文对长梗黄精多糖脱蛋白工艺进行研究,采用盐酸法、Sevag法和TCA法对长梗黄精粗多糖进行脱蛋白并进行比较。综合三种脱蛋白方法的实验结果显示,盐酸法效果最差,蛋白质的脱除率和多糖的保留率分别是45.7%、78.6%;TCA效果较好,但是技术较繁琐,蛋白质的脱除率和多糖的保留率分别是75.88%、93.55%;Sevag法效果最显著,蛋白质的脱除率和多糖的保留率分别是90.94%、81.16%。(3)以长梗黄精多糖液为研究对象,对其脱色纯化的最佳工艺进行研究,利用反胶束溶液和大孔树脂进行比较实验,获得较好的脱色方式,并进一步探讨了不同工艺条件下各因素对色素脱除率和多糖损失率的影响。结果显示,长梗黄精多糖中的色素采用大孔树脂吸附作为脱除技术,其作用较好。通过对8种吸附树脂研究表明,NKA-Il树脂效果最好,其静态吸附最佳工艺条件为:pH6,脱除色素的温度40℃,脱除色素的时间4h,树脂用量为2g/10mL,以上工艺参数可获得,长梗黄精多糖的脱除色素率和多糖的损失率分别是72.35%、23.18%;动态吸附最佳工艺条件为:流动相的流速2BV/h,上样的体积为2BV,上样的浓度为1mg/mL,以上工艺参数可获得,长梗黄精多糖的脱除色素率和多糖的损失率分别是82.47%、27.68%。(4)以长梗黄精多糖为研究对象,以果蝇繁殖力、LF含量和CAT活性为指标,研究长梗黄精多糖的抗氧化能力。结果显示,在实验范围内,长梗黄精多糖可显著提高果蝇的繁殖能力;培养基中含有1.6%的长梗黄精多糖有助于果蝇体内LF含量的下降,并提高CAT活性。长梗黄精多糖可增强CAT酶一类体内存在的抗氧化酶能力,清除果蝇体内的自由基,以此增强果蝇抗氧化能力,延缓衰老。
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