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Cullin3是属于Cullin家族的E3连接酶骨架蛋白。过去的研究发现,与在细胞增殖及免疫反应过程中发挥重要作用的SCF(Skpl—Cullinl—F box protein)E3连接酶复合物模式类似,具有BTB结构域的衔接蛋白与Cullin3(Cul3)结合组成E3连接酶复合物,并结合特异性的底物,介导Cul3对底物的降解。人类基因组编码近200个含有BTB结构域的蛋白,提示Cul3在体内具有广泛的底物,并可能在多种蛋白降解的调控中发挥重要的作用。目前的研究表明,Cul3在拟南芥、线虫、果蝇以及小鼠等动物模型中的缺失或突变都将导致胚胎致死的表型,说明Cul3在进化上的保守性及其可能具有的重要生物学功能。但是,至今对Cul3底物及其降解机制却知之甚少。
本研究发现当Cul3的表达量在RNAi的作用下减少时,细胞将出现形态的变化以及应力纤维(stress fibers)的大量增加。进一步的研究发现,这些变化是由于泛素介导的小G蛋白RhoA的降解出现障碍而引起的。在果蝇S2细胞中,通过RNAi技术对含有BTB结构域蛋白的筛选发现了一个从果蝇到人类保守的含有BTB结构域的蛋白家族BACURD。BACURD可与Cul3形成E3连接酶复合物,并与小G蛋白RhoA结合;由Cul3/BACURD组成的E3连接酶复合物可以特异性的介导小G蛋白RhoA的泛素化和降解。当细胞内BACURD的表达量在RNAi的作用下减少或在细胞内转染不结合Cul3的BACURD点突变时,细胞中的应力纤维会明显增加;当Cul3/BACURD复合物功能紊乱时,HeLa细胞以及小鼠MEF细胞的运动都会受到阻碍,并将导致爪蟾胚胎早期发育特别是原肠期汇聚延伸(Convergent extension)的发育过程发生异常。
本研究发现了一个在进化上保守的E3连接酶复合物Cul3/BACURD降解小G蛋白RhoA。这是一个新的调节小G蛋白RhoA的分子机制,并在细胞运动和胚胎发育的调节中发挥重要的作用。