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半个世纪以来,陆栖微生物早已成为抗生素、酶抑制剂等生物活性物质的重要资源,一度形成了辉煌的抗生素时代。随着抗生素的广泛应用,在临床上引起两个问题:一是细菌耐药性逐年增加,致使一些抗生素的疗效降低,甚至无效;另一问题是一些不致病的细菌成为条件致病菌,在临床上造成一定的威胁。因而需要不断筛选新结构和新的抗菌作用机制的新抗生素以满足临床需要。然而对陆生微生物的长期研究已使得陆地这一古老资源日趋枯竭,因此,拓宽寻找新药的途径迫在眉睫。海洋独特的自然条件:高压、低营养、无光照、局部高温、高盐等,使得海洋微生物具有特殊的代谢途径和遗传背景,从而具有产生特殊结构和功能活性物质的能力。据研究发现,约27%的海洋微生物都能产生抗菌活性物质。已经成为筛选新型抗生素的重要来源。
本文对分离自大连黑石礁海域海水样品的一株具有抗菌活性的硫酸盐还原细菌SRB-22菌株及一株具有抗菌活性的光合细菌PSB-11菌株进行了研究,考察了菌株不同培养时间对活性物质产量及活性强弱的影响,并对其抗菌活性代谢产物进行了研究。主要研究结果如下:通过对SRB-22菌株抗菌活性物质的研究,建立并优化了大孔吸附树脂提取SRB-22菌液中活性产物的方法,确定了最佳提取方案为:SRB-22菌液沙滤,除去硫化物颗粒,调菌液pH6,通过NKA大孔吸附树脂柱。发酵液与树脂的最适质量比为9/1。经过正相硅胶柱层析、制备薄层层析、反相硅胶柱层析及反相HPLC制备层析,从SRB-22菌液粗提物中得到1个纯化合物,通过对其1H谱、13C谱DEPT-90及DEPT-135谱的解析,再与有关文献报道的数据进行比较,确定该化合物为邻苯二甲酸单丁酯。对PSB-11菌株抗菌活性物质的研究中,考察了不同培养时间对活性物质产量的影响;建立并优化了大孔吸附树脂联用提取菌液中活性产物的方法。通过实验,确定了最佳培养时间为28天;确定了最佳提取方案为:调菌液pH至8.0,过H103树脂柱,再调pH至7.0,过SIPI-40树脂柱;从60L菌液分离得到11.18克固相萃取物,确定了含有极性差异较大活性物质的3个活性组分。