调强放射治疗因为能够在给予肿瘤靶区高剂量的同时，减少肿瘤周围重要脏器或组织的剂量，而广泛地应用于各种肿瘤的放射治疗中。目前国内的调强放疗多采用“step and shoot”技术，对于一个鼻咽癌患者，单次照射2Gy的剂量需要20—30分钟。众多研究提示，在使用调强技术时，照射时间的延长对于细胞的存活比率有着一定程度的影响。但是对于鼻咽癌调强放疗来说，单次照射时间延长对于鼻咽癌细胞的存活比率是否有影响，影响的程度又如何尚无学者进行研究。 【目的】 研究人鼻咽癌瘤株CNE在体外照射时间相比常规照射方法，在照射时间延长的情况下，生物效应的变化情况。 【方法】 对人鼻咽癌细胞株CNE(中国科学院上海生科院细胞所提供)，在37℃、5％C02的恒温培养箱中进行细胞培养。然后给予不同的剂量进行照射，照射结束后细胞恒温培养箱中孵育10天。培养结束后，予95％酒精固定。用苏木精进行核染色，计数大于50个细胞的克隆数目。采用GRAPHPAD Prism 4.0软件，根据LQ模型拟合曲线，并进行统计分析。首先是建立CNE细胞株的剂量存活曲线，对不同的细胞数给予0Gy、2Gy、4Gy、6Gy、8Gy、10Gy照射，每个剂量点设三瓶细胞，实验重复3次。第二部分为对人鼻咽癌瘤株CNE进行相同剂量而不同间隔时间的研究。10000个细胞接受4Gy×2次照射，2次照射时间间隔为0h、0.5h、1h、1.5h、2h、4h。每个剂量点设三瓶细胞，实验重复3次。第三部分为模拟常规放射治疗的方法对人鼻咽癌瘤株CNE进行不同剂量照射。分别接受0Gy、2Gy、2Gy×2次、2Gy×3次、2Gy×4次、2Gy×5次照射，每次照射间隔24小时，每2Gy的照射时间分别为2min、20min、40min。每个剂量点设三瓶细胞。实验重复3次。使用GRAPHPAD Prism 4.0软件，根据LQ模型[sF=EXP(-α*Dose-β*Dose<2>)]拟合曲线。计算α、β、α/β、SF<,2>等参数。比较2min组、20min组和40min组的细胞存活比率的差异。并用GRAPHPAD Prism 4.0软件行双侧T检验。 【结果】 实验一发现，CNE瘤株α/β值为1.76Gy。随后进一步的实验发现，CNE瘤株在大分割4Gy×2次照射时，连续照射SF为1％；而在2次照射间隔2小时的时候SF上升至2.52％。在模拟临床上使用的剂量分割2Gy/(次*天)时，发现在总剂量达到10Gy时，连续照射组的SF为1.25％，间隔20分钟时SF为1.90％，间隔40分钟时SF为2.47％。双侧T检验均有统计学差异。 【小结】 1、人鼻咽癌瘤株CNE瘤株α/β值为1.76Gy，提示可能在照射时间延长的条件下，鼻咽癌细胞存活比率受到的影响较大。 2、人鼻咽癌瘤株CNE瘤株在大分割4Gy×2次照射时，连续照射SF为1％；而在2次照射间隔2小时SF上升至2.52％。在模拟临床上使用的剂量分割2Gy／(次*天)时，在总剂量达到10Gy时，连续照射组的SF为1.25％，间隔20分钟时为1.90％，间隔40分钟时为2.47％。双侧T检验均有统计学差异。提示在体外照射延长照射时间时，鼻咽癌瘤株CNE细胞存活分数较连续照射时大大增加。 3、在鼻咽癌的调强放疗的工作实践中，应该尽量减少单次照射所需要花费的时间，或者考虑适当的进行剂量补偿。为了进一步评价体内的鼻咽癌细胞在调强放疗中的生物效应的变化情况，在临床工作中我们应该记录每次治疗所需时间，根据疗效来评估照射时间延长引起的体内肿瘤细胞生物效应变化情况。