PARP-1抑制剂AG014699对人卵巢癌细胞株SKOV3增殖及凋亡的影响

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背景众所周知,女性上皮性卵巢癌由于早期发现率低、临床症状不明显、病情迅速进展、生物学特性错综复杂以及手术后短期内容易复发等多种原因;该病的5年生存率一直都徘徊在35%-40%之间,已经成为目前女性生殖器恶性肿瘤里具有最大威胁的疾病。近些年来,虽然在卵巢癌的治疗方面已经取得了巨大进展,但是,卵巢癌患者的生存率仍无显著提高;所以一种新型的有效的化疗药物的出现成为迫切需要。聚腺苷二磷酸核糖聚合酶[Poly(ADP-ribose) polymerase, PARP]是一种与单链DNA损伤修复密切相关的核酶,由Chambon等于1963年首次报道,已证实在多种肿瘤组织中的表达明显增高。而AG014699是活性最强的PARP-1抑制剂,为水溶性,它能有效抑制BRCAl, BRCA2(Breast cancer assoeiated gene-1and2,乳腺癌相关基因1和2)基因缺失乳腺癌、黑色素瘤以及脑胶质瘤等肿瘤的生长。AG014699从而有望成为一种新型的化疗药物应用于卵巢癌的临床治疗中。目的探讨PARP-1抑制剂AG014699在体外对人卵巢癌细胞株SKOV3增殖及凋亡所产生的影响,从而为卵巢癌的治疗寻找一种新的途径的可能,提高卵巢癌患者的治疗效果,提高她们的生存率。方法1.MTT:采用MTT法测定AG014699在1.0、10、20、50、100μmol/L等不同浓度分别作用24小时、48小时和72小时在体外对人卵巢癌细胞株SKOV3增殖作用的直接影响;从而根据MTT实验结果确定在下一步流式细胞仪检测中AG014699的作用浓度和作用时间。2.流式细胞仪测定:用流式细胞仪测定AG014699在5Oμmol/L浓度下对人卵巢癌细胞株SKOV3作用24h后对细胞周期分布的改变及凋亡的影响。结果1.MTT测定:在24、48、72h时AG014699在10、20、50、1OOμmol/L浓度时分别测得的OD值与对照组相比P<0.05,有统计学差异;而随着AG014699作用时间的延长增加,不同浓度作用下的抑制率逐渐降低,各药物浓度作用在24h时抑制作用最强,IC50约为100μmol/L.2.流式细胞仪测定:AG014699在50gmol/L浓度下对SKOV3作用24h能明显改变细胞的周期分布:与对照组的细胞相比,G0/G1期细胞所占比例明显增加(P<0.05);同时AG014699在50μmol/L浓度下能明显诱导卵巢癌细胞的凋亡。结论PARP-1抑制剂AG014699在体外能明显抑制卵巢癌细胞株SKOV3的增殖并能改变细胞的周期分布,诱导其凋亡。
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