研究背景:MiR-146a是一种在单核细胞与T淋巴细胞等多种免疫细胞中高度表达microRNA。研究证明SLE患者外周血单个核细胞中miR-146a表达下调,表明miR-146a可能与SLE的发生发展密切相关,但其具体机制尚不明确。IRAK1是miR-146a的靶点之一,也是细胞炎症信号转导的重要分子。TLR4是一种介导天然免疫反应的跨膜信号转导受体,通过激活NF-κB启动炎症反应。因此本研究首先观察了miR-146a是否通过调控IRAK1参与炎症反应的调节。虽有证据表明miR-146a在SLE患者体细胞内表达异常,但其在血清中的表达水平及其临床意义尚不明确,因此本研究同时探讨miR-146a在SLE患者血清中的表达水平及临床意义。目的:探讨miR-146a是否通过其靶基因IRAK1调控TLR4/NF-κB信号通路,参与炎症反应的调节。同时探讨其在SLE患者血清中的表达水平及临床意义。方法:本研究利用miR-146a mimic和miR-146a inhibitor上调和下调THP-1细胞内的miR-146a水平,观察miR-146a对IRAK1表达的影响。在此基础上,利用LPS激发THP-1细胞的炎症反应,检测核内NF-κB水平和细胞培养上清IL-6和TNF-α的水平,观察miR-146a对NF-κB的活化及促炎症细胞因子分泌的影响。收集120例SLE住院患者和30例健康体检者血清,通过检测miR-146a、IL-6和TNF-α,分析SLE患者血清miR-146a的临床意义。结果:MiR-146a能够显著降低THP-1细胞IRAK1的表达,降低细胞核内NF-κB水平和细胞培养上清IL-6和TNF-α的水平,与相应对照组相比P<0.01。SLE患者血清miR-146a水平明显低于健康对照组,P<0.01;SLE活动组和非活动组相比,血清miR-146a水平有所降低,但没有统计学差异P>0.05。血清miR-146a作为临床检验标志物,其灵敏度为80.0%,特异度为75.0%,对于SLE具有一定的的诊断价值。分析了10例健康志愿者和30例SLE患者血清miR-146a与促炎症细胞因子的相关性,发现miR-146a的△CT值与TNF-α的水平呈正相关,相关系数r=0.478,P<0.01,但与IL-6的水平无明显相关性(P>0.05)。结论:(1)高表达miR-146a后,其靶基因IRAK1mRNA和蛋白显著下降;而降低miR-146a的表达后其靶基因IRAK1mRNA和蛋白表达水平却升高了,证明miR-146a可以负性调节其靶基因IRAK1的表达。(2)高表达miR-146a后,NF-κB蛋白显著降低,细胞上清IL-6、TNF-α水平显著降低,抑制miR-146a后,NF-κB蛋白显著升高,细胞上清IL-6、TNF-α水平显著升高。显示了miR-146a可通过调节靶基因IRAK1来调控TLR4/NF-κB信号通路,影响炎症细胞因子的分泌。(3)miR-146a在SLE患者血清显著低表达水平,其作为临床检验标志物,其灵敏度为80.0%,特异度为75.0%,作为新的临床检验标志物用于用于判断SLE具有一定诊断价值。(4)SLE患者血清中IL-6、TNF-α的含量都明显升高,对SLE疾病的发生发展具有重要意义。(5)SLE患者血清中miR-146a相对表达量与炎症细胞因子TNF-α的含量成明显负相关;SLE中可能存在异常表达的miR-146a通过其靶基因IRAK1负性调控TLR/NF-κB信号通路,促进下游炎症细胞因子IL-6和TNF-α的分泌,进而影响疾病的发生发展。