铁棍山药多糖的纯化、结构及胃肠调节活性研究

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铁棍山药营养价值丰富,为山药中的上品。山药多糖作为其重要的活性成分之一,具有促进消化、抗氧化、提高免疫及降血糖等功效。本论文从铁棍山药多糖的提取纯化、结构特征及胃肠功能调节活性等方面进行了研究。具体研究结果如下:以山药多糖的提取得率为指标,用响应面分析法对铁棍山药多糖的浸提工艺进行优化。其最佳工艺参数为:浸提温度71℃、时间2.55 h、pH 8.2和液料比10.5:1,多糖提取得率为13.95%。通过水提醇沉、酶-Sevag法脱蛋白和透析除盐等得到铁棍山药粗多糖(CCYP),采用琼脂糖4B凝胶层析纯化CCYP,得到三种多糖组分CYP-A、CYP-B和CYP-C,对含量较多的CYP-A组分进行研究。紫外光谱扫描(UV)和高效液相色谱(HPLC)表明CYP-A为不含核酸和蛋白质的均一多糖组分,其分子量为1.87×103 kDa。组分分析CYP-A的糖含量为92.59%,糖醛酸含量为6.67%。红外(FT-IR)、气质(GC-MS)和核磁(NMR)谱结果表明CYP-A为含鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖和半乳糖醛酸的酸性多糖,其摩尔比为3.08:4.11:25.59:8.72:3.44:8.08:1,且其糖链中含α和β糖苷构型。CYP-A经高碘酸氧化、Smith降解分析得出CYP-A含有1→2,1→3,1→4,1→6和1→3,6型的糖苷键。电子显微镜(SEM)和原子力显微镜(SFM)下CYP-A的微观形态呈链状分布,I2-KI实验证明CYP-A是具有多分支或侧链的大分子,刚果红和圆二色谱实验显示CYP-A存在多股螺旋构象。研究了 CYP-A在体外模拟胃、肠液中的消化行为,结果表明:多糖CYP-A经体外模拟胃、肠液消化后,分子质量降低,多糖溶液中的还原糖含量增加,但未有单糖释放。CYP-A能够减缓葡萄糖的扩散、对α-淀粉酶和胰脂肪酶的活性有抑制作用,并且可以结合胆汁酸,瓦解胆固醇胶团。CYP-A能明显改善小鼠急性酒精性胃粘膜损伤,提高酒精性损伤抑制率,并且能提高小鼠胃组织NO含量和SOD酶活性,降低MDA含量,说明CYP-A对胃粘膜损伤的保护机制可能与增强胃粘膜保护因子,提高抗氧化和降低脂质过氧化能力有关。
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