MicroRNA-539下调骨桥蛋白的表达抑制类风关滑膜细胞增殖的机制研究

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目的:本研究旨在通过增加microRNA-539(miR-539)而下调骨桥蛋白(OPN)的表达,从而抑制类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(MH7A)的增殖,研究了OPN在类风湿关节炎发生发展中的作用。方法:研究共纳入68例RA患者和46例骨关节炎患者。收集病人治疗前外周血和关节液,并采用实时荧光定量—逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测骨桥蛋白(OPN)mRNA和miR-539的表达水平,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)和蛋白印迹实验(Western blotting)方法检测OPN蛋白的表达。用生物信息学分析预测到miR-539与OPN具有靶向关系,并通过双荧光素酶实验验证了这一发现。此外,在MH7A细胞中进行agomiR-539转染和siRNA敲低OPN,并使用MTT实验分析MH7A细胞增殖的情况。结果:在RA患者血液和关节液中OPN显著增加,而两种样本中miR-539的表达显著降低(P<0.05)。通过siRNA沉默OPN后,MH7A细胞的增殖减少(P<0.05)。上调miR-539后,OPN表达显著降低并且细胞增殖受到抑制。双荧光素酶测定揭示miR-539通过与3’非翻译区互补结合来调节OPN表达。结论:OPN的表达在RA患者的血液和关节液中显著增加,这可能与mi R-539的下调有关。miR-539可能通过调节OPN促进RA的发生和发展。
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