大菱鲆消化酶的性质研究

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本文综述了国内外鱼类消化酶研究的进展,从生物化学的角度研究了大菱鲆(Scophalmus maximus)消化酶的性质。文中探讨了①养殖水温下大菱鲆消化酶的分布及各种消化酶作用的最适温度最适pH。②主要化学试剂对大菱鲆消化酶活性的影响。③利用非变性电泳对大菱鲆消化酶的分离。④不同生长阶段大菱鲆消化酶的变化。结果如下: 1、将大菱鲆消化系统分为胃、幽门盲囊、前肠、中肠和后肠5部分。各部位蛋白酶活性的最适pH、温度依次为40℃,2.0;40℃,8.0;60℃,8.0;40℃,8.5;60℃,8.0。18℃养殖水温下,在适宜的pH范围内,蛋白酶活力从高到低为幽门盲囊>胃>前肠>中肠>后肠。各部分淀粉酶活性的最适pH、温度依次为40℃,6.5;40℃,8.0;40℃,7.5;50℃,7.0;40℃,8.0.18℃养殖水温下,在适宜的pH范围内,淀粉酶活力从高到低为幽门盲囊>前肠>中肠>后肠>胃。各部分脂肪酶活性的最适pH、温度依次为40℃,7.5;40℃,6.5;40℃,7.0;40℃,7.5;40℃,7.5。18℃养殖水温下,在适宜的pH范围内,脂肪酶活力从高到低为,前肠>中肠>幽门盲囊>后肠>胃。 2、本文以酶学分析的方法研究了EDTA、NaCl 11种金属离子(Cu2+、Mg2+、Fe3+、Hg2+、Zn2+、Ca2+、Pb2+、Cd2+、Ag+和Mn2+)对大菱鲆胃蛋白酶、前肠蛋白酶、幽门盲囊淀粉酶和前肠脂肪酶活力的影响。EDTA浓度设置为0.2×10-3mol/L、0.5×10-3mol/L、1×10-3mol/L、2×10-3mol/L 4个浓度,NaCl浓度设置为0.05 mol/L、0.1 mol/L、0.2mol/L、0.5mol/L4个浓度,11种金属离子浓度分别设置为5×10-3mol/L浓度。实验表明,EDTA、NaCl对蛋白酶没有显著的作用,Ca2+、Mg2+、Fe3+对蛋白酶有激活作用,Cu2+、Hg2+、Ag+对蛋白酶有不同程度的抑制作用;Ca2+、Mn2+对淀粉酶有激活作用,EDTA、NaCl、Cu2+、Zn2+、Cd2+、Pb2+、Hg2+、Mg2+对淀粉酶有抑制作用;NaCl、K+、Ca2+对脂肪酶有激活作用,Cu2+、Mg2+、Fe3+、Hg2+、Zn2+、Pb2+、Cd2+、Ag+和Mn2+对脂肪酶有抑制作用。 3、以一龄大菱鲆为研究材料,利用非变性电泳对大菱鲆消化酶进行了初步分离。蛋白酶采用明胶原位消化法,胃蛋白酶在酸性条件下检测出6条酶带,其中有一条强带,2条中强带,3条弱带:幽门盲囊蛋白酶检测出4条酶带,其中有2条强带,1条中强带,1条弱带;前肠蛋白酶检测出3条酶带,其中有2条强带,1条弱带,而且3条酶带与幽门盲囊蛋白酶的前三条酶带分别在同一分子量水平上,只是酶活性低一些;在中肠蛋白酶检测出了2条弱酶带;后肠蛋白酶检测出1条弱酶带,而且与中肠蛋白酶第一条带在同一分子量水平上。淀粉酶采用淀粉酶同工酶法,胃淀粉酶检测出l条中强酶带;幽门盲囊淀粉酶检测出4条酶带,3条强带,1条弱带:前肠淀粉酶检测出2条酶带,1条中强带,l条弱带;中肠、后肠淀粉酶各检测出1条弱带:而且,胃、中肠、后肠淀粉酶带和幽门盲囊、前肠第二条带在同一分子量水平上。脂肪酶采用脂肪酶同工酶法,胃脂肪酶检测出4条酶带,1条强带,1条中强带,2条弱带;幽门盲囊脂肪酶检测出与胃脂肪酶相似的酶带;前肠脂肪酶检测出5条酶带,2条强带,1条中强带,2条弱带;中肠脂肪酶检测出5条酶带,l条强带,2条中强带,2条弱带。后肠脂肪酶检测出与中肠脂肪酶相似的酶带,只是每一条带活性都要小一些;消化系统各部分的第一条脂肪酶带都在同一分子量水平上。4、大菱娜消化酶的种类和活力大小随着鱼体的生长发育发生了变化。大菱醉消化道蛋白酶活力变化表明:在5个生长阶段蛋白酶活力呈上升的趋势,至二年龄时达到最大,但各生长阶段的增长速度各不相同;30日龄至90日龄蛋白酶活力增长速度最快,90日龄至180日龄,增长速度稍快,tl即日龄至一年龄增长速度较慢,一年龄至二年龄增长很少,一年龄鱼与二年龄鱼的蛋白酶活力基本持平。大菱鲜消化道淀粉酶活力变化表明:在5个生长阶段淀粉酶活力呈先上升后下降的趋势,180日龄时活力达到最大;30日龄至90日龄蛋白酶活力增长速度最快,90日龄至180日龄,增长速度变慢,180日龄至一年龄酶活开始下降,一年龄至二年龄继续下降。大菱娜消化道脂肪酶活力变化表明:脂肪酶活力在5个生长阶段呈逐渐上升的趋势,至二年龄时达到最大。
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