论文部分内容阅读
多发性硬化症（MultipleSclerosis，MS）是一种以CD4+T细胞浸润中枢神经系统引起神经元轴突髓鞘脱落为特点的自身免疫性疾病。CD4+T细胞的过度激活，尤其是Th1和Th17的激活被认为是MS的直接致病原因。趋化因子受体作为介导免疫细胞迁移的重要G蛋白偶联受体(G-proteincoupledreceptors，GPCRs)，在MS病情发展过程中也发挥了重要作用。不同的免疫细胞特异性高表达不同的趋化因子受体，比如Th1细胞优先表达CCR5和CXCR3，而Th17细胞特异性高表达CCR6。 越来越多的研究认为，Th17在MS的发展过程中发挥了更加重要的作用，抑制CCR6的功能是否能够阻滞Th17的迁移，达到缓解MS病情的目的？已有多个研究小组研究了CCR6基因敲除小鼠对实验性自身免疫性脑脊髓炎（experimentalautoimmuneencephalomyelitis，EAE），多发性硬化症的动物模型的易感性，结果他们得出了两个完全相反的结论，其中一部分人认为，相对于WT小鼠，CCR6基因敲除小鼠诱导的EAE，其病情要显著减轻;而另外一部分人则证明，CCR6基因敲除小鼠诱导的EAE比WT更严重。在本项研究中，我们用CCR6的小分子拮抗剂及CCR6基因敲除小鼠进行EAE的研究。首先，我们用钙流实验的高通量筛选平台得到44-G8和金精三羧酸（AurintricarboxylicAcid，ATA)两个化合物，其中44-G8是CCR6的特异性拮抗剂，ATA为CCR6的非特异性拮抗剂，可抑制CCR4、CCR5、CCR6、CCR7、CCR9、CXCR4、CXCR5及CXCR6等趋化因子受体的功能。接下来的结果表明，44-G8并不能缓解EAE的病情，CCR6基因敲除小鼠诱导EAE，其病情相对于对照组，也没有显著减轻。而非特异性趋化因子受体拮抗剂ATA则能显著改善EAE的临床症状。机制研究表明，ATA对Th1和Th17的体外分化并没有影响，且不会抑制DCs抗原递呈的功能等，而是通过抑制DC由血液向脾脏的迁移，使Th1和Th17的活化增殖分化比例减少，并且ATA还同时阻滞炎症性淋巴细胞透过血脑屏障浸润CNS的过程，在这种双重作用下，ATA达到了缓解EAE的目的。我们的研究表明CCR6可能不适合作为MS的治疗靶点，而通过靶向多靶点的方式阻断多发性硬化症进程中的不同阶段，也许是治疗MS更好的方法。