壳聚糖基蛋白质固定化载体的制备及其性能研究

来源 :中国人民解放军军事医学科学院 解放军军事医学科学院 | 被引量 : 4次 | 上传用户:sun_zhimin_dl
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本文采用戊二醛—冰乙酸交联溶胀法、多聚磷酸钠单凝聚法及海藻酸钠复凝聚法制备了壳聚糖基蛋白质载体,对三种不同方法制备的载体分别进行了BSA的固定化研究,利用OM、SEM、TEM考察了其外观形貌,对粒径、FTIR基团间键合情况、包封率、载药量及体外释放行为等作了较为深入的研究,并从产物提取、蛋白质活性保持及包封率等角度出发,对三种制备方法进行了比较。以FITC标记的BSA(FITC-BSA)为模型蛋白质,对海藻酸钠复凝聚法微胶囊膜的蛋白质双向通透性能作了较为深入的研究。研究表明,三种方法制备的载体均可对BSA进行固定化。由戊二醛—冰乙酸交联溶胀法制备的载体包封率在10%~40%之间,但残余的少量交联剂戊二醛,对蛋白质的活性会造成潜在影响;由多聚磷酸钠单凝聚法制备的载体包封率在20%~30%之间,但产物不易提取;由海藻酸钠复凝聚法制备的载体包封率较高,通过对实验条件的控制可达到85.37%,且未使用有机溶剂,制备条件温和,产物易提取,故适用于蛋白质的固定化。海藻酸钠复凝聚法微胶囊膜通透性能的研究显示,该微胶囊有体积相变特性,囊膜对FITC-BSA具有通透性,且FITC-BSA在膜上是先吸附后渗透的一个过程。海藻酸钙微胶囊通透性好于海藻酸钠—壳聚糖复凝聚法微胶囊,且在海藻酸钠—壳聚糖复凝聚法微胶囊中,当组成物壳聚糖和海藻酸钠溶液浓度都在1.0%以上时,壳聚糖浓度越小,蛋白质通透性能越好,海藻酸钠浓度对通透性能影响不显著。以海藻酸钠复凝聚法微胶囊作为载体对凝血酶的固定化进行了初步研究。结果显示,该微胶囊能对凝血酶进行固定化。动态凝血实验表明,该微胶囊凝血酶固定化效果较好,包封率较高,活性保持相对较好;生物相容性实验表明,该微胶囊会引起轻微炎症反应,植入后1周炎症明显,随植入时间延长炎症有所好转。
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