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研究背景:乳腺癌作为女性的常见肿瘤,对身心健康产生了严重的威胁,而且其全球发病率始终呈上升趋势。脱落的癌细胞会随着血液或淋巴液等途径向远处发生转移,其恶性程度往往危及患者生命。血管生成在生理事件中是必不可少的,例如在胎儿发育过程中的器官发生、子宫内膜增生阶段和伤口愈合过程等,同时它也涉及各种病理过程,包括病理性血管新生与增殖性疾病(如糖尿病视网膜病变、类风湿性关节炎)和实体瘤的进展等。正常情况下,血管形成促进因子和抑制因子共同维持体内血管新生的平衡稳态。该平衡一旦被打破后会激活血管系统,导致过度的血管生成或血管系统被抑制发生退化。肿瘤血管生成过程指的是肿瘤本身或其周围组织中的血管以出芽的方式产生新的以毛细血管为主的血管系统。它不仅需要血管内皮细胞分裂增殖、细胞外基质重塑,也需要血管内皮细胞向肿瘤组织迁移及管腔样结构的形成。血管生成抑制蛋白(Vasohibin,VASH)是由血管内皮生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(Fibroblast Growth Factors-2,FGF-2)诱导血管内皮细胞(Endothelial Cells,ECs),使其产生和分泌的一种血管生成负反馈调节剂,参与血管内皮细胞的凋亡。主要表达于血管生成终止区的内皮细胞中,具有负反馈抑制血管生成的特性,VASH-1被证明能抑制血管内皮细胞的迁移和血管管腔样结构的形成。该蛋白在人或鼠胚胎的血管内皮细胞中表达较高,还在多种癌症、糖尿病视网膜病变、类风湿性关节炎及粥样硬化病变的血管内皮细胞中表达明显增加。VASH-1作为一种低毒高效的血管生成抑制剂,目前已被应用到血管病变以及依靠新生血管支持的疾病中,利用其抑制新生血管生长的特性,达到对疾病的治疗以及控制的目的。目的:探究外源性VASH-1对人乳腺癌细胞系MCF-7细胞和人脐静脉内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVECs)生物学行为的影响。研究外源性VASH-1与HUVECs成管能力的关系。方法:1.采用CCK-8(Cell Counting Kit-8)法探讨外源性VASH-1对乳腺癌细胞系MCF-7细胞以及HUVECs增殖能力的影响。2.通过细胞划痕实验观察外源性VASH-1对乳腺癌细胞系MCF-7细胞以及HUVECs迁移能力的影响。3.Transwell小室法检测外源性VASH-1对乳腺癌细胞系MCF-7细胞侵袭行为以及其对HUVECs穿膜能力的影响。4.平板克隆形成实验用于检测外源性VASH-1对乳腺癌细胞系MCF-7细胞的克隆形成能力情况。5.通过HUVECs体外成管实验分析外源性VASH-1对血管生成的作用。结果:CCK-8检测结果提示外源性VASH-1能有效的抑制MCF-7细胞和HUVECs的增殖,与对照组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。施加外源性VASH-1的乳腺癌细胞系MCF-7细胞和HUVECs划痕迁移速度和穿膜细胞数均低于对照组(P<0.05),MCF-7 VASH-1组癌细胞克隆形成率明显低于对照组(P<0.05)。VASH-1对HUVECs小管的形成有显著抑制效果(P<0.05)。结论:VASH-1具有抑制乳腺癌细胞和内皮细胞生物学行为以及内皮细胞血管生成的能力,此发现为进一步研究VASH-1在血管生成中的作用机制提供了理论基础,提示VASH-1在乳腺癌的发生、发展中发挥重要的作用,为乳腺癌的治疗提供了一个新靶点。