鲟鱼肽性质表征及其抗衰老作用的研究

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鲟鱼养殖目前成为水产养殖的一个热点。养殖鲟鱼的主要目的是为了获得鲟鱼卵,它是高级鱼子酱的重要原料。鲟鱼头是鲟鱼加工的主要副产物,目前鲟鱼头并没有得到很好的利用,这其中的主要问题在于酶解获得的鲟鱼肽(Acipenser schrenki Brandt peptides,ASP)的生物活性没有很好的研究。本论文对从鲟鱼副产物制备的ASP的性质进行研究,进而利用D-半乳糖致衰老小鼠模型以及非标记定量蛋白质组学技术研究鲟鱼肽的抗衰老作用,以期从分子水平上阐述鲟鱼肽抗衰老机理。得到的主要研究结果如下:1.采用枯草杆菌酶对鲟鱼头等进行酶解、脱色、喷雾干燥得ASP,其分子量分布为805.42-3219.50 Da。ASP中含有蛋白质的量为48.39%,总糖含量为21.15%。红外光谱分析表明ASP中含有肽及硫酸软骨素。ASP中酸性氨基酸Asp及Glu含量最多,其次是Gly,含量较少的氨基酸是Met、His及Tyr。ASP经过胰蛋白酶消化并进行nano-ESI-MS/MS,根据BLAST2(http://www.ebi.ac.uk/tools/blast2)分析获得12个短肽序列,分别为VLPEDGRP、ASYLDCIK、DGLGDVAFVK、APNHAVVSRK、DDTKCLVDLR、NSEPWAKDLK、GSNFQLNELQGK、AVKWCALSHHER、YLGADYIKAVSNLR、CSTSRLLEACTFHK、TVRWCAVNDHEASK及QETIFENLPSKDER。ASP具有清除·OH自由基、DPPH·自由基以及ABTS~+·的能力。2.通过对去除高丰度蛋白后的灌胃ASP小鼠血清进行蛋白质组分析,获得442种蛋白。发现这些蛋白质参与21个生理过程、具有7类分子功能、存在于10个细胞组分中。将衰老模型组与ASP灌胃组进行t-test分析,得到3个差异表达蛋白质。在进行生物信息学分析时,扩大筛选标准,得到9种蛋白质。这些蛋白质中,二磷酸甘油酸变位酶(AC:P15327)、载脂蛋白D(AC:P51910)、黄素还原酶(AC:Q923D2)和过氧化物酶-2(AC:Q61171)的上调以及巯基氧化酶1(AC:Q8BND5)的下调可以提高机体清除自由基的能力。这些结果表明ASP是通过提高机体清除自由基的能力来发挥其抗衰老作用的。ASP可以作为潜在的具有抗衰作用的药物及食品。
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