论文部分内容阅读
研究目的本研究创新性应用荧光原位杂交(FISH)技术检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者现场细胞学(ROSE)制片的表皮生长因子受体(EGFR)基因扩增状态,旨在探讨以NSCLC患者气管镜取得细胞学或组织块标本的ROSE制片为标本,FISH检测其EGFR基因扩增状态的应用。以及探讨EGFR基因扩增状态在NSCLC患者中与其年龄、性别、吸烟状态、病理类型、分化程度、肿瘤TNM分期等临床特征的相关性。研究方法本研究在2013年9月至2014年12月期间对就诊于天津医科大学总医院呼吸内科气管镜室且胸部X线或CT检查怀疑肺部恶性肿瘤性病变而行诊断性治疗的患者在气管镜检查过程中予以ROSE制片指导其进行程度。然后应用FISH技术在原ROSE制片上检测71例最终取材经过病理科医师细胞学或组织学确诊为NSCLC患者的EGFR基因扩增状态,并将FISH结果与患者临床特征进行统计学比较。其数据结果应用SPSS16.0统计软件处理,P<0.05视为差异具有统计学意义。结果1.在本研究中ROSE恶性细胞阳性并且考虑NSCLC的72例患者仅有3例因取材量小而未得到病理科确诊,病理报告1例为未找到肿瘤细胞,另外2例为可见可疑核异质细胞;另有2例现场ROSE恶性细胞阳性但观察形态考虑为小细胞肺癌(SCLC)的患者最终经病理科确诊病理类型为低分化鳞癌;本研究中ROSE对NSCLC患者制片中恶性细胞的现场诊断与最终病理确诊的符合率可达95.9%,且研究进行期间ROSE诊断未出现假阴性的结果;最终共搜集NSCLC患者ROSE制片71例行FISH检测,其中有68例(95.8%)患者顺利取得结果,另外3例患者ROSE制片分别因为1例细胞数目过少、1例细胞重叠过多影响信号读取与1例杂交后出现部分区域无杂交信号及部分区域杂交率较低而导致FISH检测的失败。2.其EGFR基因发生扩增,即FISH(+)的患者共23例,其中7例为簇状扩增。EGFR基因扩增率为33.8%。并且经过统计学分析,EGFR基因扩增状态与患者性别(χ2=0.176,P=0.675)、年龄(χ2=2.796,P=0.094)、吸烟状态(χ2=0.584,P=0.445)、病理类型(χ2=1.248,P=0.264)、肿瘤分化程度(χ2=1.234,P=0.267)、肿瘤TNM分期(P=0.474)的统计结果均无明显统计学差异(P均>0.05)。结论本研究搜集NSCLC患者ROSE制片,创新性的应用FISH技术在ROSE制片的原片上进行EGFR基因扩增的检测,研究结果表明:1.NSCLC患者气管镜细胞学及组织块标本的ROSE阅片结果与最终诊断结果一致性良好,并且FISH技术可应用于ROSE制片作为标本来检测EGFR基因的扩增状态,此方法不仅使得细胞学的FISH研究更加科学、严谨;而且较传统方法更加快捷、经济。但应注意提高气管镜室ROSE制片的质量,因为其质量可直接影响气管镜检查的进度及FISH结果的取得。FISH结果的顺利取得还需在进行过程中注意杂交区域的正确选择、水浴与消化等步骤的适度等。2.本研究中NSCLC患者的EGFR基因扩增率为33.8%,且其在不同性别、不同年龄、不同吸烟状态、不同病理类型、不同肿瘤分化程度、不同TNM分期中不存在明显的差异,即未发现NSCLC患者的EGFR基因扩增状态与临床特征的显著相关性。