鸭病毒性肝炎（Duck Viral Hepatitis，DVH）是雏鸭的一种高度致死性急性传染病，以肝炎为主要特征，病原是鸭肝炎病毒（Duck Hepatitis Virus，DHV）。我国流行的鸭肝炎以Ⅰ型DHV（DHV-Ⅰ）为主。预防本病的最有效的措施是疫苗接种，目前我国尚无商品化疫苗，用于预防DVH的疫苗主要是DHV鸡胚化弱毒疫苗、DHV鸡胚化灭活苗和DHV鸭胚化灭活苗。鸡胚化和鸭胚化疫苗，相对于细胞苗而言，其操作繁琐、产量低，因此，将DHV适应鸡胚或鸭胚成纤维细胞，对于改进DHV疫苗生产工艺，提高疫苗产量具有重要意义。本研究将DHV-E₅₃鸡胚致弱株适应鸭胚成纤维细胞，连续传代至第16代时出现明显的细胞病变，第21代时细胞病变呈现规律性，接毒后72h细胞病变达到80%，其病变特征是细胞间隙增宽、细胞崩解死亡、脱落。通过RT-PCR对DHV-ED适应株各代次进行鉴定，均得到目的条带，结果表明DHV-E₅₃株能够在鸭胚成纤维细胞上增殖。间接免疫荧光法（IFA）鉴定，接种DHV-ED₁₆株的鸭胚成纤维细胞有明显的特异性绿色荧光，说明DHV-ED₁₆株病毒能够感染细胞。进行适应株遗传特性分析，利用RT-PCR扩增出DHV-ED₁₆和DHV-ED₃₀代的VP0、VP1及VP3基因，序列比对发现：DHV-ED₁₆和DHV-ED₃₀的VP1基因与参考序列之间核苷酸、氨基酸均无差异；而DHV-ED₁₆和DHV-ED₃₀的VP0、VP3基因与参考序列之间核苷酸、氨基酸的同源性均在99%以上。生物学特性研究：适应株DHV-ED₁₆、DHV-ED₂₁、DHV-ED₂₆、DHV-ED₃₀在鸭胚成纤维细胞上的TCID50分别为10^-3.42/0.1ml、10^-3.86/0.1ml、10^-3.93/0.1ml、10-3.46/0.1ml；将100TCID50DHV-ED₁₆、DHV-ED₂₁、DHV-ED₂₆和DHV-ED₃₀分别接种于鸭胚成纤维细胞，在不同时间收集病毒，测定病毒效价，绘制病毒生长曲线，结果表明DHV-ED₁₆、DHV-ED₂₁、DHV-ED₂₆及DHV-ED₃₀均在72h左右病毒滴度达到高峰，随着时间增长，病毒滴度增长缓慢，较为平稳；DHV-ED₁₆株的鸡胚ELD-5.3250为10/0.2mL（9日龄SPF鸡胚），病变特点为胚胎发育不良，胚体较小，体表充血、出血，腹部水肿，并且肝脏有出血斑点及细小坏死灶；DHV-ED₁₆株的鸭胚ELD50为10^-4.78/0.2mL（9日龄SPF鸭胚），病变特点与鸡胚相似，为鸭胚胎发育不良，胚体较小，体表大面积充血、出血，腹部水肿，并且肝脏有出血斑点及细小坏死灶等特点。安全性试验表明，接种0.5mlDHV-ED₁₆细胞适应株的雏鸭均生长状况良好并且动物剖检未见异常变化；免疫DHV-ED₁₆弱毒株和亲本毒DHV-E₅₃株鸡胚尿囊液的成年母鸭抗体水平均不断上升，并在第5周达到最高峰，随后缓慢下降，但是DHV-ED₁₆株免疫组的免疫效果与亲本毒DHV-E₅₃株免疫组相比抗体水平略低，但无明显差异。