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目的:1.通过对哮喘患者血清中ROCK2含量的检测,初步探究ROCK2在哮喘疾病中的临床意义。2.探讨ROCK2抑制剂影响ROCK2、MLCK及VEGF的表达干预哮喘小鼠气道重塑机制的研究。方法:1.按照随机的方法选取首诊哮喘患者及体检健康者每组各40人,ELISA法检测两组患者血清中ROCK2的含量、肺功能及痰涂片嗜酸性粒细胞计数,并根据哮喘患者的严重程度进行分级。2.将30只BALB/C雌性小鼠按照随机原则分为对照组、哮喘组、Y27632组,每组10只。采用鸡卵白蛋白致敏诱导建立哮喘模型。以HE染色法显微镜下观察小鼠肺组织病理改变,ELISA检测血清中OVA-sIgE、肺泡灌洗液中ROCK2、MLCK以及VEGF的水平。RT-PCR检测肺组织中ROCK2、MLCK以及VEGF mRNA的表达,运用Image-pro plus图像分析软件测定支气管管壁面积(WAt)、支气管平滑肌面积(WAm),以支气管管腔内周长(PBM)标准化,数据分析采用单因素方差分析中LSD-t法进行组组之间比较,且以P<0.05为标准代表差异有统计学意义。结果:临床研究结果显示:对照组与哮喘组ROCK2血清含量分别为5.55±1.15ng/ml以及37.59±6.63ng/ml,哮喘组明显高于对照组(p<0.05)。两组肺功能检查结果显示,哮喘组肺功能指标均明显低于对照组(p<0.05)。哮喘患者血清ROCK2含量与肺功能FEV1(%预计值)成负相关(r=-0.96,p<0.001);哮喘组患者血清ROCK2含量与哮喘严重程度分级呈正相关(rs=0.819,p<0.001)。哮喘组患者血清ROCK2含量与嗜酸性粒细胞无相关性。哮喘小鼠实验研究显示:HE染色显示哮喘组小鼠支气管管壁增厚,支气管周围大量炎症细胞浸润,而Y27632组小鼠肺组织支气管壁厚度及炎性细胞浸润程度明显减轻。小鼠血清OVA-sIgE哮喘组[(137.84±23.96)ng/ml]明显高于对照组[(33.02±9.27)ng/ml]且(P<0.05),Y27632组OVA-sIgE[(57.89±14.90)ng/ml]水平低于哮喘组(P<0.05)。ELISA法检测肺泡灌洗液中ROCK2、MLCK以及VEGF的含量显示:哮喘组小鼠分别为[(52.46±10.17、103.62±11.98、57.09±20.82)ng/ml]显著高于对照组[(24.40±6.13、40.46±10.75、36.54±15.98)ng/ml],(均P<0.05);Y27632组分别为[(32.87±8.95、57.36±8.50、38.46±9.22)ng/ml]均低于哮喘组(均P<0.05)。RT-PCR检测小鼠肺组织中ROCK2、MLCK以及VEGF mRNA的相对表达含量显示:哮喘组小鼠分别为(4.37±1.51、5.44±2.11、5.51±1.34)均明显高于对照组(1.03±0.38、1.18±0.45、2.12±0.62)(均P<0.05);Y27632组分别为(2.67±1.75、2.04±1.19、2.75±0.99)均低于哮喘组(均P<0.05)。图像采集分析各组小鼠WAt/PBM、WAm/PBM的比较:哮喘组小鼠分别为[(17.4±3.81、8.24±1.85)μm]显著高于对照组[(5.45±1.69、2.41±0.69)μm](均P<0.05),Y27632组分别为[(10.38±2.24、5.77±2.04)μm]均低于哮喘组(均P<0.05)。结论:1.哮喘患者血清ROCK2明显增高且与哮喘疾病的严重程度密切相关,有助于检测临床哮喘患者的病情。2.哮喘疾病中ROCK2、MLCK和VEGF含量明显升高,通过Y27632干预ROCK2的表达后小鼠气道重塑程度明显减轻,Rho/ROCK信号转导通路可能通过影响下游MLCK和VEGF表达参与哮喘气道重塑。