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混浊敏感蛋白（HAP）是引起啤酒稳定性下降的主要因素之一，建立快速准确可靠特异的方法检测HAP具有重要意义。本研究首先利用硅胶对混浊蛋白的吸附特性而初步分离出HAP，再通过凝胶过滤（Sephadex G-75）柱纯化，去除10-25kDa的少量连续蛋白片段，经SDS-PAGE电泳纯度鉴定，最终获得纯度较高的HAP（MW约40kDa）。纯化的HAP利用考马斯亮蓝法粗略估算为1.616mg·mL-1。经Western Blot鉴定，硅胶洗脱蛋白的抗体对制备的混浊蛋白具有较高的特异性。利用HPLC对啤酒中蛋白与HAP中氨基酸含量进行比对，HAP中富含脯氨酸，含量约为44％，显著高于前者。同时就硅胶的添加量和硅胶孔径大小对硅胶的吸附效果进行比对。结果发现，硅胶添加量增至1.5g·L-1时基本上达到吸附平衡，小孔径硅胶有利于对混浊蛋白的吸附，对提高啤酒稳定性具有深远意义。本研究利用纯化的HAP免疫BALB／c小鼠，通过杂交瘤技术成功制备了3株特异性单克隆抗体，分别命为HP1、HP2和HP3。3株单抗鉴定结果为：HP1属于小鼠IgG2b亚类，HP2和HP3属于小鼠IgG2a亚类；HP1和HP2具有不同的抗原识别表位，而HP2和HP3识别位点相近；特异性实验结果证明3株单抗均具有较好的反应特异性，与LTP1、Z4和Z7均不发生交叉反应。本论文建立了检测混浊敏感蛋白的双抗体夹心酶联免疫检测技术（DAS-ELISA）。经反复筛选，确定其最佳工作条件为：最佳包被液为pH9.6的碳酸盐缓冲液；抗体包被的最佳工作浓度为5.5μg·mL-1；0.5％BSA具有较好的封闭效果；孵抗原的最佳工作浓度为4.04μg·mL-1；抗体HP2按1：1000稀释时效果最好；酶标羊抗鼠IgG最佳工作浓度为1：3000；HP2抗体作用60min；底物最佳作用时间为20min。DAS-ELISA法用于检测啤酒中混浊敏感蛋白具有较高的特异性，与Z4、Z7及LTP1无交叉反应，对混浊敏感蛋白极限浓度为2.52υg·mL-1，灵敏度为252ng，且该方法具有较好的重复性和稳定性。