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目的:探讨caveolin-1对氧糖剥夺/复氧(Oxygen glucosedeprivation/reoxygenation,OGD/R)人脐带血内皮祖细胞(endothelialprogenitor cells,EPCs)中VEGF的影响。 方法:密度梯度离心法获得单个核细胞,接种于鼠尾I型胶原包被培养板,用内皮细胞专用培养液EGM-2培养,观察EPCs生长情况,通过观察细胞生长形态、双荧光染色法、免疫荧光细胞化学染色法和流式细胞仪等对EPCs鉴定;选取EPCs高表达的时间点,构建针对caveolin-1基因的RNA干扰真核表达质粒,建立基因沉默模型和OGD/R模型,随机分为正常对照组、OGD/R组、caveolin-1基因沉默组、caveolin-基因沉默OGD/R组,免疫荧光法和Western-Blot法检测caveolin-1及VEGF的表达。 结果:1.人脐带血分离培养可获得内皮祖细胞,在培养的10d~21d出现贴壁及典型“铺路石”样形态,双荧光染色法、免疫荧光细胞化学染色法及流式细胞仪可成功鉴定EPCs; 2.成功构建人脐带血内皮祖细胞caveolin-1基因沉默模型,caveolin-1的表达在caveolin-1基因沉默组显著低于正常对照组,差异有显著统计学意义(P<0.01); 3.Caveolin-1的表达在caveolin-1基因沉默组显著低于正常对照组,差异有显著统计学意义(P<0.01);OGD/R组caveolin-1表达明显高于正常对照组,差异有显著统计学意义(P<0.01);OGD/R组caveolin-1表达明显高于caveolin-1基因沉默OGD/R组,差异有显著统计学意义(P<0.01);caveolin-1基因沉默组caveolin-1表达量高于caveolin-1因沉默OGD/R组,差异有统计学意义(P<0.05); 4.VEGF的表达在caveolin-1基因沉默组显著低于正常对照组,差异有显著统计学意义(P<0.01);OGD/R组VEGF表达明显高于正常对照组,差异有显著统计学意义(P<0.01);OGD/R组VEGF表达明显高于caveolin-基因沉默 OGD/R组,差异有显著统计学意义(P<0.01);caveolin-1因沉默组VEGF表达量高于caveolin-1因沉默OGD/R组,差异有统计学意义(P<0.05); 5.直线相关性分析 人脐带血内皮祖细胞caveolin-1表达与VEGF表达的关系:VEGF与caveolin-1表达的相对吸光度值呈显著正相关,差异有显著统计学意义(r=0.879,P<0.01)。 结论:Caveolin-1能够影响OGD/R的EPCs中VEGF的表达,是促进血管细胞损伤修复的可能因素之一。