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随着传统抗生素的大量以及不正当使用，药物残留和菌株耐药性等问题变得越来越严重。研究与开发更为有效，同时对人、动物以及环境无害的现有抗生素的替代品是当今科研领域的研究热点。抗菌肽是生物体内经诱导产生的一类具有生物活性的小分子多肽，是宿主免疫防御系统的一个重要组成部分，具有广谱抗菌、抗真菌、原虫、带包膜的病毒及癌细胞等多种生物学功能，同时抗菌肽有着独特的抗菌机制，细菌不易产生耐药性。这些优点使得抗菌肽在替代传统抗生素方面显示了巨大潜力和广阔的应用前景。CAP18是从兔嗜中性粒细胞中分离得到的一种大小为18kDa的抗菌肽，CAP18<,106-142>是CAP18羧基端截短的37个氨基酸残基组成的功能性小片段，对G<->和G<+>细菌都有抑制活性，具有独特的LPS中和活性，并且在许多极端条件下还能发挥其抗菌作用。因而CAP18<,106-142>在临床上对脓毒血症以及内毒素休克的治疗具有良好的应用前景；可以作为一种新型的治疗药物，特别是针对一些耐药性的菌株；也可以作为辅助治疗药物与抗生素联合使用，治疗G<->细菌引起的感染。并且目前尚未有利用基因工程方法制备CAP18的研究报道，所以本课题就是在大肠杆菌表达系统中实现抗菌肽CAP18活性片段(CAP<,106-142>)的大规模表达，为基因工程方法规模化生产抗菌肽CAP18<,106-142>及其它贵重肽类奠定了理论与实践基础，对建立抗菌肽基因工程菌和抗菌肽研究的共性技术具有重要意义。
本试验主要结果如下：
1．根据抗菌肽CAP18活性片段CAP<,106-142>的氨基酸序列，按照大肠杆菌密码子偏爱性，采用SOE技术，设计合成了CAP18的编码基因：
2．将获得的CAP18片段连入pMD18-T载体上，测序正确后，与表达载体pET32a构建重组表达载体，经PCR和酶切鉴定正确后得到重组质粒p-cap；
3．转化Ecoli BL(DE3)后，经IPTG诱导，利用SDS-PAGE和Western blot确定了重组蛋白的表达；
4．对常规表达条件进行优化，确定了最佳诱导条件为30℃、菌密度0.8左右、0.6mmol/L，的IPTG浓度、诱导时间为4h，并且可溶性CAP18融合蛋白在总可溶性蛋白中所占比例超过了40％;
5．引入了一种复合自动诱导培养基，并对培养基中的关键成分进行了优化，得到了一种新型高效的复合自动诱导培养基(CAI-4)，在CAI-4中的可溶性CAP18融合蛋白的表达量与未优化的LB培养基相比提高了40倍以上，与条件优化后的相比也提高了16倍以上；
6．经Ni<2+>亲和层析后回收CAP18融合蛋白，纯度达到了85％以上，但产量较低，平均每升诱导细菌培养物(在CAI-4中)仅获得200mg融合蛋白：
7．对纯化的融合蛋白进行酶切，能够对切割后的样品进行初步活性鉴定，确定了重组抗菌肽CAP18具有抑菌活性。