番茄红素对黄曲霉毒素B1诱导小鼠脾脏免疫功能抑制的干预作用及机制

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黄曲霉毒素B1(AFB1)具有免疫毒性,可抑制机体免疫器官发育、免疫细胞和细胞因子的功能,导致机体免疫功能抑制。氧化应激和细胞凋亡是其重要机制。番茄红素(LYC)是一种被国际认可的食源性营养素,具有抗氧化、抗癌、抗炎及调控免疫等功效。为探讨LYC干预AFB1诱导小鼠脾脏免疫功能抑制的作用及机制,本实验以雄性昆明小鼠为受试对象,首先设定梯度剂量的AFB1,通过观测小鼠体重、脾脏重量、脾脏系数、脾脏结构及血清IL-2、IL-4和TNF-α含量,确定AFB1暴露小鼠免疫功能抑制模型复制成功,并筛选出后续LYC干预实验所用AFB1剂量;而后将小鼠随机分为对照组(CG)、AFB1组(AG,0.75 mg/kg AFB1)、LYC干预组(ALG,0.75 mg/kg AFB1+5 mg/kg LYC)和LYC对照组(LG,5 mg/kg LYC),观测脾脏结构和功能、氧化应激状态和细胞凋亡水平,旨在评估LYC对AFB1暴露小鼠脾脏免疫功能抑制的干预效果及机制。实验结果如下:(1)与CG相比,AG小鼠体重、脾脏重量和脾脏系数显著降低(p<0.05;p<0.01);与AG相比,ALG小鼠脾脏重量和脾脏系数显著升高(p<0.05),表明LYC可缓解AFB1诱导小鼠脾脏生长发育抑制。CG和LG小鼠脾脏红、白髓区界限明晰,排列紧密,AG小鼠脾脏红、白髓区界限模糊,脾脏红髓区出现充血现象,白髓区淋巴细胞减少,胞间缝隙增大,细胞排列杂乱,ALG小鼠脾脏红髓区充血现象较AG减轻,白髓区淋巴细胞增多,细胞排列较整齐紧密,红、白髓区界限恢复清晰,表明LYC可缓解AFB1诱导小鼠脾脏结构损伤。(2)与CG相比,AG小鼠脾脏CD3+、CD4+和CD8+T淋巴细胞数目显著降低(p<0.01);与AG相比,ALG小鼠脾脏上述结果显著升高(p<0.05;p<0.01)。与CG相比,AG小鼠血清IL-2、IL-4和TNF-α含量显著降低(p<0.01),脾脏IL-β、IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ和TNF-αmRNA表达显著降低(p<0.01);与AG相比,ALG小鼠血清TNF-α含量显著升高(p<0.01),脾脏IL-β、IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ和TNF-αmRNA表达显著升高(p<0.05;p<0.01);ALG与CG相比脾脏IL-β、IL-6和TNF-αmRNA表达显著升高(p<0.05;p<0.01),表明LYC可缓解AFB1诱导小鼠脾脏免疫功能抑制。(3)与CG相比,AG小鼠脾脏ROS、H2O2和MDA含量显著升高(p<0.01),CAT、SOD活性和T-AOC显著降低(p<0.01);与AG相比,ALG小鼠脾脏ROS、H2O2和MDA含量显著降低(p<0.05;p<0.01),CAT、SOD活性和T-AOC显著升高(p<0.05),表明LYC可缓解AFB1诱导小鼠脾脏氧化应激。(4)与CG相比,AG小鼠脾脏细胞凋亡率、Cyt-c蛋白表达、Caspase-3和Caspase-9mRNA表达和活性及Bax mRNA和蛋白表达显著升高(p<0.05;p<0.01),MMP、Bcl-2 mRNA和蛋白表达和Bcl-2/Bax比率显著降低(p<0.05;p<0.01);与AG相比,ALG小鼠脾脏细胞凋亡率、Cyt-c蛋白表达、Caspase-3和Caspase-9活性和mRNA表达及Bax mRNA和蛋白表达显著降低(p<0.05;p<0.01),MMP、Bcl-2 mRNA和蛋白表达和Bcl-2/Bax比率显著升高(p<0.05;p<0.01),表明LYC可缓解AFB1诱导小鼠脾脏细胞凋亡。结论:LYC可有效缓解AFB1诱导的脾脏免疫功能抑制,且与缓解氧化应激和抑制细胞凋亡有关。
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