紫象草花色苷的提取纯化、结构分析及特性研究

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紫象草,也称红象草(Pennisetum purpureum Schumab cv.Reed),原产非洲,是一种多年生、高产优良的禾本科牧草,热带和亚热带地区都已广泛种植,在我国也已广泛栽培,其叶片和茎秆呈鲜亮的紫红色,富含花色苷,具有较高的利用价值。本试验以紫象草为原料,研究了紫象草花色苷的提取纯化工艺、稳定性、抑菌活性、体外抗氧化性,并对紫象草花色苷的结构进行了初步鉴定,同时用pH示差法测定不同高度紫象草花色苷的含量。本试验主要研究结果如下:1.优化紫象草花色苷提取工艺利用响应面法优化得到的最佳提取工艺条件为:提取剂pH=2,乙醇体积分数为50%,浸提温度为35℃,溶液浸提时间为60min,料液比为1:20。2.紫象草花色苷的纯化及结构初步鉴定。通过吸附率和解吸率结果对比,选用X-5大孔树脂对紫象草花色苷进行纯化,纯化条件为:解吸剂为pH=3、体积分数为60%的乙醇溶液,解吸流速为2.0mL/min。纯化后紫象草花色苷回收率为89.9%。紫象草花色苷的结构分析结果:矢车菊-3-O-葡萄糖苷,占紫象草花色苷总含量的26.08%,锦葵花素,占紫象草花色苷含量为1.98%,另外还含有两种结构未知的锦葵花色苷。3.紫象草花色苷稳定性及抑菌活性研究紫象草花色苷在不同溶剂中溶解性不同,水、甲醇、乙醇、乙酸中均能完全溶解,部分溶于丙酮,不溶于乙酸乙酯、四氯化碳;在溶液pH值为2-5时花色苷较稳定,中性及碱性条件下不稳定,并且颜色变化明显,但短时间内,调整溶液pH后颜色可恢复;高温和强光都能加快紫象草花色苷的降解速率;Mn2+、Mg2+、Ca2+、Na+、Mg2+、K+、Zn2+金属阳离子对紫象草花色苷基本没有影响,Fe3+、Cu2+、Fe2+对紫象草花色苷的稳定性有显著影响,溶液颜色明显变色,并且在500-530nm范围内无最大吸收值;氧化剂可使紫象草花色苷降解,双氧水浓度越大,紫象草花色苷降解速率越快。紫象草花色苷对Bacillus subtilis(枯草芽孢杆菌)、Staphylococcus aureu(金黄色葡萄球菌)andEschierichia coli(大肠杆菌)均有抑制作用,最小抑制浓度分别为1.725mg/mL、1.725 mg/mL、0.863 mg/mL。4.紫象草花色苷体外抗氧化性研究紫象草花色苷对超氧阴离子、羟基自由基、DPPH(二苯基苦味胼基自由基)等都有一定的清除作用,并且随着浓度的增加清除作用增加。紫象草花色苷浓度与总抗氧化能力的线性关系为:y=0.429x+1.173,R2=0.9947,说明紫象草花色苷的总抗氧化能力随着浓度的增加而增大,总酚含量纯化后比纯化前增加了 5.6倍。5.不同高度紫象草花色苷含量测定1.5 m、2.0 m、2.5 m、3.0 m、3.5 m高度紫象草的花色苷含量分别为:1.061 mg/g、2.252 mg/g、2.632 mg/g、2.633 mg/g、2.669 mg/g。
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