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目的:1、通过不同剂量感染期犬弓首线虫虫卵感染妊娠早期昆明小鼠,检测仔鼠血清细胞因子(IL-2,IL-4,IL-10,IFN-r),从而了解妊娠早期感染犬弓线虫是否对仔鼠产生保护作用。2、探讨妊娠早期感染犬弓首线虫虫卵后仔鼠行为学改变及脑组织病理学变化,是否与感染剂量呈相关性。3、综合实验结果为犬弓首线虫幼虫移行症的孕期保健和免疫防治提供一定的临床依据。 方法:1、犬弓首线虫标本采集及感染期虫卵的制备。2、实验动物模型的建立:把雄鼠和雌鼠以1∶2比例配对合笼,将确定受孕成功的雌鼠随机分为对照组(A)、低剂量感染组(B)、高剂量感染组(C)3个组:对照组(A)每只灌胃等量生理盐水;低剂量感染组(B)每只灌胃1×103个犬弓首线虫感染期虫卵;高剂量感染组(C)每只灌胃3×103个犬弓首线虫感染期虫卵。在仔鼠6周龄时,从A、B、C各组随机挑选80只,其中40只攻击感染灌胃0.5×103个犬弓首线虫感染期虫卵,另外40只仔鼠灌胃等量生理盐水。实验共分6组:A1(A组仔鼠灌胃生理盐水)、A2(A组仔鼠灌胃0.5×103虫卵)、B1(B组仔鼠灌胃生理盐水)、B2(B组仔鼠灌胃0.5×103虫卵)、C1(C组仔鼠灌胃生理盐水)、C2(C组仔鼠灌胃0.5×103虫卵)。2、细胞因子检测:在仔鼠攻击感染后第7、14、28、56天,定期随机在6组中各取7只仔鼠常规内眦静脉取血,收集血清,用间接ELISA检测血清细胞因子(IL-2,IL-4,IL-10,IFN-r)的含量。3、行为学检测:在仔鼠长到15周龄,从6组中随机各取10只检测爬行能力、抓握能力、鼠尾协助平衡能力;对热刺激的逃避反应;从迷宫入口至出口所需时间。实验完毕后处死参与行为学检查的仔鼠,做稀盐酸幼虫分离,观察脑内幼虫数量。4、病理学检查:仔鼠8周龄时在各组中随机处死5只,解剖后取脑组织,制作常规HE染色石蜡切片,观察各组之间的病理学变化。 结果:1、①各组仔鼠血清细胞因子(IL-2、IL-4、IL-10、IFN-r)含量,差异具有统计学意义(P<0.05)。②A2、B2、C2组血清中IL-2、IL-4、IL-10、IFN-r含量高于A1、B1、C1组仔鼠血清细胞因子的含量,差异具有统计学意义(P<0.05)。③各细胞因子之间变化规律不同:Th1细胞产生的细胞因子IL-2在感染早期呈上升趋势,在感染后4周时达到高峰,以后逐渐下降;IFN-r在感染早期呈上升趋势,在感染后第2周达到高峰以后逐渐下降。Th2细胞产生的细胞因子IL-4和IL-10攻击感染后呈下降趋势,且下降趋势在感染早期下降明显,感染后期逐渐放缓。2、各组仔鼠行为学检测结果差异具有统计学意义(P<0.05),在A2、B2、C2组中B2组成绩最好,B1成绩好于C1组。3、经过稀盐酸幼虫分离法,分离出的幼虫数量与行为学表现呈负相关。4、脑组织病理切片:幼虫与周围脑组织有间隙,虫体周围的脑细胞受压变扁,有少量胶质细胞增生和脑细胞变性,但虫体周围脑组织炎症反应不明显。 结论:1、妊娠早期感染孕鼠会对仔鼠产生免疫调节作用,且可诱导仔鼠面对后天加强感染时产生明显保护性免疫记忆;仔鼠的获得性免疫,在加强感染的早期可能以TH2细胞占优势。2、妊娠早期感染犬弓首线虫会导致仔鼠行为学改变,脑内幼虫数量越多,行为能力越差。3、妊娠早期的感染与成年后的直接感染对脑组织的病理学影响一致。