人干扰素融合蛋白作为长效干扰素的一个成员，在延长干扰素体内的半衰期，达到长效的抗病毒、抗肿瘤、抗增殖方面发挥着重要的作用。干扰素与IgG-Fc片段的融合蛋白(IFNα2b-Fc)已经被证明可延长干扰素在大鼠体内半衰期达至65小时，存留时间120小时以上，这显示了IFNα2b-Fc是延长IFN体内血液半衰期的有效方式。本文主要通过构建高表达IFNα2b-Fc的毕赤酵母菌株，优化发酵条件建立大规模生产IFNα2b-Fc的发酵工艺。　　 毕赤酵母表达外源蛋白有两个常用的启动子，包括甲醇诱导的AOX启动子和甘油组成性诱导的pGAP启动子。载体pucz9K含有AOX启动子，rDNA-pGAP含有pGAP启动子，二者都含有Zeocin筛选标记基因。IFNα2b-Fc融合基因克隆进pucz9K和rDNA-pGAP质粒中，转入毕赤酵母X-33菌株，通过YPD+Z培养板筛选阳性克隆，进一步通过Westernblot和ELISA方法筛选出高表达克隆。我们对甲醇诱导的毕赤酵母的发酵进行摇瓶水平的发酵的优化，我们从中优化出甲醇诱导阶段的发酵条件，即在温度25℃，pH5左右，甲醇浓度控制在每24小时添加至1％左右时发酵产量最大。然后我们研究7.5升发酵罐放大发酵的培养条件，我们发现在发酵的过程中添加酪蛋白可以抑制IFNα2b-Fc的降解。我们发现用组成型启动子pGAP生产的IFNα2b-Fc融合蛋白在色层分离后更加容易除去杂蛋白，蛋白序列分析表明IFNα2b-Fc融合蛋白在Fc区有一个潜在的可被毕赤酵母进行N-糖基化修饰的位点。