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本研究以湖南野生春兰(Cymbidium goeringii)引种驯化过程中发生的炭疽病病害株为试验材料,分离并鉴定了两株致病菌,暂命名为CCH和CCB,测定其致病性,并分析其生物学特性。基于此,筛选、鉴定了3株针对性的生防菌,并对ZY721菌株发酵物的活性成分进行了初步鉴定。具体如下：1.病原菌的分离鉴定以及生物学特性分析CCH菌株的菌落圆形,灰色,气生菌丝发达、疏松絮状；显微观察菌丝有隔,分生孢子无色、单胞、表面光滑、长圆柱形、两端钝圆,大小为13.2-20.1μm×4.0-6.1μm,长宽比约为3.2。结合ITS和28S rDNA序列分析鉴定CCH为Colletotrichum gloeosporioides(Penz.)Penz. & Sacc.。CCB菌株的菌落圆形,白色,绒状平铺；显微观察CCB病原菌菌丝有隔；分生孢子为无色、单胞、表面光滑、长圆柱形、一端钝圆,一端基部稍平截,呈脐状,大小为9.1-18.2 μm×4.6-6.5 μm,长宽比约为2.5。结合ITS和28S rDNA序列分析鉴定CCB为(Colletotrichum boninese Moriwaki,Sato & Tsukiboshi。致病性试验结果表明：在刺伤的情况下,病原菌CCH和CCB更易感染春兰和春剑,可感染建兰、虎头兰、多花兰,但几率较小。该病原菌可能通过伤口侵染兰科兰属多种植物。通过分析营养因子和非营养因子对CCH和CCB病原菌生长的影响,结果表明：春兰炭疽病病原菌CCH和CCB的适宜生长培养基有PDA、PSA和CSA；能有效利用多种碳源,其中CCH优先利用葡萄糖,而CCB除葡萄糖外,还能较好利用蔗糖、麦芽糖、果糖；CCH和CCB优先利用有机氮为酵母膏,无机氮为硝酸钾；光照与黑暗对菌丝生长的影响无显著性差异；适宜的pH值为5.0～8.0；在15～35℃均能生长,CCH和CCB最适生长温度分别为28℃和25℃；处理20 min,菌丝和孢子的致死温度分别为48和50℃。2.生防菌的分离鉴定以病原菌CCH和CCB为防治靶标,从两种不同生境中分离出3株具有生防效果的微生物,它们分属3大微生物类群,即真菌、放线菌和细菌。暂分别命名为ZQ967、 ZL966和ZY721。ZQ967对病原菌CCH和CCB均具有明显抑菌效果,根据形态学特点结合其ITS序列分析结果鉴定为青霉菌属的草酸青霉(Penicillium oxalicum)。ZL966对病原菌CCH和CCB均具有显著抑菌效果。根据高氏1号培养菌落特征及扫描电镜观察其具有典型的链霉菌属特征,结合16s rDNA序列分析,鉴定为链霉菌属的浅绛红链霉菌(Streptomyces purpurascens)。ZY721对病原菌CCH和CCB均具极显著抑菌效果。菌株ZY721在NA培养基中菌落呈白色,较大,伞形,表面有褶皱,中央突起。显微观察细胞呈杆状,大小为(0.7-0.8)μmx (2.0-3.0) μm;综合分析菌株ZY721的来源、形态、生理生化特征和16s rDNA序列结果,鉴定为枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis (Ehrenberg) Cohn。3.ZY721菌株发酵液抑菌效果菌株ZY721发酵液与PDA培养基按不同体积比混合对病原菌CCH和CCB进行抑菌试验。结果表明：按1：1体积比处理时,ZY721发酵液对病原菌CCH和CCB的抑制效果均达到100%；按1：2、1：4、1：8、1：16体积比时,其抑菌率随之降低,3d时对CCH和CCB的抑制率分别为54.27、48.37、35.98、27.64%和52.31、37.95、19.23、14.36%。ZY721菌株发酵液对病原菌CCH的抑制效果优于对CCB。4.ZY721菌株发酵液活性成分的鉴定酸化法提取ZY721菌株发酵液活性成分的产物得率可达1%(质量体积比)。提取物对病原菌CCH和CCB的抑菌效果与其发酵液相似,测定其最小抑菌浓度均为0.15625 mg/mL。提取物甲醇溶液的最大吸收波长为203 nm；红外光谱分析结果显示其主要基团归属蛋白质和脂类；UPLC-ESI-MS结果发现质荷比(m/z)离子峰集中在两个区域,即1000-1100和1450-1550,前者为核心部分。1000-1100(m/z)内5个谱峰为脂肪酸链相差一个亚甲基(-CH2)的同系物,推测为脂肽Iturin C同系物,即C13-Iturin C、C14-Iturin C、C15-Iturin C、C16-Iturin C、C17-IturinC。1450-1550(m/z)内的主要谱峰推测为3种脂肽Fengycin A同系物和7种Fengycin B同系物。