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本研究以初始体质量(4.67±0.27)g的大鳞副泥鳅(Paramisgurnus dabryanus)为研究对象,分别配制添加0.00(对照组)、0.30、0.60、0.90、1.20%丙氨酰-谷氨酰胺(Ala-Gln)的5种的饲料,进行8周生长试验。饲喂大鳞副泥鳅8周后,进行48h急性氨氮胁迫(100 mg/L),分别在胁迫0、24、48h取样,探讨Ala-Gln对大鳞副泥鳅生长和氨代谢的影响。结果表明:
(1)饲料Ala-Gln水平对大鳞副泥鳅生长有显著的影响。当饲料Ala-Gln水平为0.6~0.9%时,大鳞副泥鳅的终末体重、平均增重率、饲料效率和蛋白质效率均显著高于对照组(P<0.05);当饲料Ala-Gln水平为0.9%时,大鳞副泥鳅特定生长率显著高于对照组(P<0.05)。将饲料Ala-Gln水平和大鳞副泥鳅的平均增重率做抛物线回归分析,大鳞副泥鳅平均增重率最大时的最适饲料Ala-Gln水平为0.60~0.75%;将饲料Ala-Gln水平和大鳞副泥鳅的饲料效率做抛物线回归分析,大鳞副泥鳅饲料效率最大时的最适饲料Ala-Gln水平为0.60~0.72%。当饲料Ala-Gln水平为0.90%时,大鳞副泥鳅全鱼粗蛋白质含量显著高于对照组(P<0.05);当饲料Ala-Gln水平为0.90%时,大鳞副泥鳅全鱼粗水分含量显著低于对照组(P<0.05);但饲料Ala-Gln水平对大鳞副泥鳅全鱼粗脂肪和粗灰分含量无显著性影响。
(2)饲料Ala-Gln水平对大鳞副泥鳅氨、尿素及谷氨酰胺含量有显著的影响。随着饲料Ala-Gln水平的升高,血清、脑、肝及肌肉氨含量和血清、肝及肌肉尿素含量显著下降(P<0.05),肝及肌肉谷氨酰胺含量显著上升(P<0.05)。急性氨氮胁迫后(24h和48h),对照组氨含量、尿素及谷氨酰胺含量上升。但随着饲料Ala-Gln水平的升高,大鳞副泥鳅血清、脑、肝及肌肉氨含量显著下降(P<0.05),血清(24 h)、肝及肌肉尿素含量逐渐下降(P<0.05),肝和肌肉谷氨酰胺含量进一步升高(P<0.05)。
(3)饲料Ala-Gln水平对大鳞副泥鳅氨代谢酶活性有显著的影响。随着饲料Ala-Gln水平的升高,大鳞副泥鳅血清谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)及肝AST活性逐渐下降(P<0.05),脑和肝谷氨酰胺合成酶(GS)和谷氨酸脱氢酶(GDH)活性逐渐上升(P<0.05),鳃Na+/K+-ATP酶活性逐渐上升(P<0.05)。急性氨氮胁迫后(24h和48h),对照组血清AST(48 h)和ALT活性、肝AST(48 h)和ALT活性,脑、肝及肠GS和GDH活性,鳃、肠及皮肤Na+/K+-ATP酶活性均上升。但随着饲料Ala-Gln水平的升高,大鳞副泥鳅血清AST和ALT活性、肝AST(48 h)和ALT活性下降(P<0.05),脑、肝及肠GS和GDH活性上升(P<0.05),鳃、肠及皮肤Na+/K+-ATP酶活性进一步上升(P<0.05)。
(4)饲料Ala-Gln水平对大鳞副泥鳅氨转运表达有显著的影响。随着饲料Ala-Gln水平的升高,大鳞副泥鳅鳃、肠道及皮肤RhbgmRNA水平逐渐上升(P<0.05),鳃、肠道及皮肤Aqp3mRNA水平逐渐上升(P<0.05),鳃、肠道及皮肤Aqp8mRNA水平逐渐上升(P<0.05)。急性氨氮攻毒后(24h和48h),对照组大鳞副泥鳅鳃、肠道及皮肤RhbgmRNA水平逐渐上升,鳃、肠道及皮肤Aqp3mRNA水平逐渐上升,鳃、肠道及皮肤Aqp8mRNA水平逐渐上升。但随着饲料Ala-Gln水平的升高,鳃(24 h)、肠道及皮肤RhbgmRNA水平进一步上升(P<0.05),鳃、肠道及皮肤Aqp3mRNA水平进一步上升(P<0.05),鳃、肠道及皮肤Aqp8mRNA水平进一步上升(P<0.05)。
本试验条件下,综合生长、氨、尿素及谷氨酰胺含量、氨代谢酶活性和氨转运基因表达指标,大鳞副泥鳅饲料中Ala-Gln最适水平为0.60~0.72%。
(1)饲料Ala-Gln水平对大鳞副泥鳅生长有显著的影响。当饲料Ala-Gln水平为0.6~0.9%时,大鳞副泥鳅的终末体重、平均增重率、饲料效率和蛋白质效率均显著高于对照组(P<0.05);当饲料Ala-Gln水平为0.9%时,大鳞副泥鳅特定生长率显著高于对照组(P<0.05)。将饲料Ala-Gln水平和大鳞副泥鳅的平均增重率做抛物线回归分析,大鳞副泥鳅平均增重率最大时的最适饲料Ala-Gln水平为0.60~0.75%;将饲料Ala-Gln水平和大鳞副泥鳅的饲料效率做抛物线回归分析,大鳞副泥鳅饲料效率最大时的最适饲料Ala-Gln水平为0.60~0.72%。当饲料Ala-Gln水平为0.90%时,大鳞副泥鳅全鱼粗蛋白质含量显著高于对照组(P<0.05);当饲料Ala-Gln水平为0.90%时,大鳞副泥鳅全鱼粗水分含量显著低于对照组(P<0.05);但饲料Ala-Gln水平对大鳞副泥鳅全鱼粗脂肪和粗灰分含量无显著性影响。
(2)饲料Ala-Gln水平对大鳞副泥鳅氨、尿素及谷氨酰胺含量有显著的影响。随着饲料Ala-Gln水平的升高,血清、脑、肝及肌肉氨含量和血清、肝及肌肉尿素含量显著下降(P<0.05),肝及肌肉谷氨酰胺含量显著上升(P<0.05)。急性氨氮胁迫后(24h和48h),对照组氨含量、尿素及谷氨酰胺含量上升。但随着饲料Ala-Gln水平的升高,大鳞副泥鳅血清、脑、肝及肌肉氨含量显著下降(P<0.05),血清(24 h)、肝及肌肉尿素含量逐渐下降(P<0.05),肝和肌肉谷氨酰胺含量进一步升高(P<0.05)。
(3)饲料Ala-Gln水平对大鳞副泥鳅氨代谢酶活性有显著的影响。随着饲料Ala-Gln水平的升高,大鳞副泥鳅血清谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)及肝AST活性逐渐下降(P<0.05),脑和肝谷氨酰胺合成酶(GS)和谷氨酸脱氢酶(GDH)活性逐渐上升(P<0.05),鳃Na+/K+-ATP酶活性逐渐上升(P<0.05)。急性氨氮胁迫后(24h和48h),对照组血清AST(48 h)和ALT活性、肝AST(48 h)和ALT活性,脑、肝及肠GS和GDH活性,鳃、肠及皮肤Na+/K+-ATP酶活性均上升。但随着饲料Ala-Gln水平的升高,大鳞副泥鳅血清AST和ALT活性、肝AST(48 h)和ALT活性下降(P<0.05),脑、肝及肠GS和GDH活性上升(P<0.05),鳃、肠及皮肤Na+/K+-ATP酶活性进一步上升(P<0.05)。
(4)饲料Ala-Gln水平对大鳞副泥鳅氨转运表达有显著的影响。随着饲料Ala-Gln水平的升高,大鳞副泥鳅鳃、肠道及皮肤RhbgmRNA水平逐渐上升(P<0.05),鳃、肠道及皮肤Aqp3mRNA水平逐渐上升(P<0.05),鳃、肠道及皮肤Aqp8mRNA水平逐渐上升(P<0.05)。急性氨氮攻毒后(24h和48h),对照组大鳞副泥鳅鳃、肠道及皮肤RhbgmRNA水平逐渐上升,鳃、肠道及皮肤Aqp3mRNA水平逐渐上升,鳃、肠道及皮肤Aqp8mRNA水平逐渐上升。但随着饲料Ala-Gln水平的升高,鳃(24 h)、肠道及皮肤RhbgmRNA水平进一步上升(P<0.05),鳃、肠道及皮肤Aqp3mRNA水平进一步上升(P<0.05),鳃、肠道及皮肤Aqp8mRNA水平进一步上升(P<0.05)。
本试验条件下,综合生长、氨、尿素及谷氨酰胺含量、氨代谢酶活性和氨转运基因表达指标,大鳞副泥鳅饲料中Ala-Gln最适水平为0.60~0.72%。