冠心病复合高血糖病证结合动物模型的建立及其生物学基础研究

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目的:利用冠状动脉左前降支(LAD)结扎手术联合STZ腹腔注射建立冠心病复合高血糖大鼠疾病模型,并进行全面、动态的观察,通过采集大鼠宏观表征和微观指标对模型证候及其时间窗进行判定。在此基础上,进一步对判定的证候模型进行生物学基础特性探索。方法:1.雄性SD大鼠适应性饲养7天后,随机分成假手术组,高糖组、结扎组和高糖结扎组,高糖组给予一次性腹腔注射STZ(55mg/kg),结扎组行LAD结扎术,高糖结扎组给与LAD手术后一次性腹腔注射STZ(55mg/kg)。分别在大鼠术后7、14、28天三个时间点取材,并采集不同时间窗的心电图、血糖、拉力实验、应激状态呼吸频率、足底图像RGB值、饮食饮水量、体质量、超声心动、心肌病理等指标以此判定模型成功与否及其证候属性。2.检测各组大鼠血中心肌损伤标志物(AST、CK、CK-MB、LDH)、血脂(TG、HDL-C、LDL-C、CHOL)、炎症因子(TNF-α、IL-1β、IL-6)、凝血(PT、APTT、TT、Fbg、Fbg-t)、纤维化(CVF)等指标,并对证候指标进行相关性分析。结果:1.高糖结扎组术后心电图出现病理性Q波,空腹血糖≥16.7mmol/L。与假手术组比较,在术后7-28天超声表现出EF、FS值显著降低(均P<0.01),术后28天心肌结构紊乱,证明冠心病复合高血糖疾病模型建立成功。与假手术组比较,模型组大鼠在术后7-28天拉力值显著降低(均P<0.01),应激状态呼吸频率显著升高(P<0.05),饮食、饮水量增加(P<0.05),体重下降明显,宏观表征出现大便干硬、小便黄等表征,符合气阴两虚证。7-28天舌、足底r 比值显著降低(P<0.01),耳背小血管增多,结扎线以下组织颜色变深,符合血瘀证。2.与假手术组相比:高糖结扎组模型的心肌损伤标记物,LDH和CK-MB在7至28天内水平显著升高(P<0.01),AST整个时间点均有差异(P<0.01),CK在7,28天有差异(P<0.05),14天无差异。总体说明,心肌损伤几乎贯穿整个观察期。血脂异常主要表现在与假手术组相比,模型组TG和LDL-C在7-28天内显著升高(P<0.01),HDL-C在7,14天水平低于假手术(P<0.05),但28天没有差异。炎症反应存在与术后7-28天以TNF-α、IL-1β及IL-6水平显著升高(P<0.01),同时高糖结扎组炎症水平也高于结扎组(P<0.05),说明高糖结扎组炎症水平相对严重。凝血异常伴随着模型组的整个病理过程,主要以Fbg值显著高于假手术组(P<0.01),且不断升高。高糖结扎组心肌纤维化严重,随着时间推移逐渐升高,CVF值显著增高相较其他组(P<0.01)。相关性分析结果,有6、5个指标分别参与了气阴两虚证、血瘀证的形成,且存在交叉。结论:1.高血糖联合LAD结扎诱导的冠心病复合高血糖模型在术后7-28天属于气阴两虚兼血瘀证。2.该模型整个过程中均存在心肌损伤、脂质代谢异常、凝血异常、炎症反应,心肌纤维化,且多呈现进行性加重。6、5个指标分别参与了气阴两虚证、血瘀证的形成,且证候之间存在交叉。
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