贵州为传统天麻产区，天麻有性繁殖技术在全省主要天麻产区被广泛推广应用，但一直以来，采用的萌发菌都来源于中国医学科学院药用植物研究所或陕西汉中地区的紫萁小菇和石斛小菇，这些萌发菌对推动贵州天麻有性繁殖起到了至关重要的作用。但近年来，由于环境气候的变化，导致很多产区外来萌发菌与天麻种子的亲和性不稳定，严重影响了天麻有性繁殖的产量；收集并选育出适宜贵州不同天麻产区的本地优良萌发菌，是解决环境适宜性和与天麻亲和性的关键。本研究主要开展天麻种子自然萌发和生长发育特性研究、萌发菌资源收集和优良萌发菌菌株筛选及应用。试验结果如下：1、揭示乌天麻和红天麻种子自然萌发和生长发育特性，建立野生萌发菌收集方法。采用4℃保存、室温保存、鲜种等3种不同方式处理的红天麻和乌天麻种子原生地播种，通过不同时间取样，观察统计种子的萌发率、死亡率和萌发生长指数。实验结果表明：天麻种子6月播种8月份有较高的萌发率，9月份种子萌发生长指数高；不同温度处理天麻种子其相对萌发率、死亡率、生长指数差异显著；常温储存种子萌发生长指数显著小于4℃储存与鲜种，4℃储存与鲜种之间萌发生长指数相近。结论：因此在5、6月份选择鲜种或短时间冷藏种子播种有利于种子的萌发，在9月份利于采样，可以获得理想的萌发菌分离材料。2、在采用单菌丝团分离法分离天麻原球茎菌根真菌的试验中，得出了不同致密度菌丝团萌发所需时间不同，大多数萌发的时间在36h，菌丝团剥离出来后将移入一新的无菌水中在18℃中进行孵育萌发后才再将其吸取在小块培养基上培养，可以减少内生细菌的污染。将孵育的温度控制在18℃同时孵育的水中加入青霉素和庆大霉素，且延长菌丝团的孵育时间。结果表明：在18℃时，细菌生长缓慢，双抗抑制细菌生长，菌丝团在18h开始萌发，41h大量菌丝团都萌发，少量的致密菌丝团未萌发。3、将收集的13个小菇属真菌与本室分离获得的1个小菇属真菌，共14个小菇属真菌，将其进行生长势、遗传多样性、萌发菌胞外酶酶活性的比较、遗传稳定性比较、与红天麻种子进行促萌发效果间的比较，筛选出4个优良的菌株。通过萌发菌菌丝尖端脱毒，进行萌发菌菌株的复壮。