【摘 要】
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豆腐柴（Premna microphylla turcz.,PMTs）是马鞭草科豆腐柴属的一种药食两用的植物,其根、茎和叶均可入药。由于其叶片具有较好的凝胶特性,常被用于制作成一种凝胶状的传统食物,称为“观音豆腐”。针对豆腐柴中化学成分有一定的研究,目前针对豆腐柴中化学成分尚缺乏快速鉴定分析的方法。文献报道豆腐柴具有显著的抗炎活性,但体内外抗炎药效活性及其作用机制,尚待深入研究。本研究拟通过基于液
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豆腐柴（Premna microphylla turcz.,PMTs）是马鞭草科豆腐柴属的一种药食两用的植物,其根、茎和叶均可入药。由于其叶片具有较好的凝胶特性,常被用于制作成一种凝胶状的传统食物,称为“观音豆腐”。针对豆腐柴中化学成分有一定的研究,目前针对豆腐柴中化学成分尚缺乏快速鉴定分析的方法。文献报道豆腐柴具有显著的抗炎活性,但体内外抗炎药效活性及其作用机制,尚待深入研究。本研究拟通过基于液质联用技术研究豆腐柴叶化学物质基础及其体内物质代谢,探讨豆腐柴叶体内效应成分;通过基于高效液相色谱的指纹图谱技术和指标成分定量分析建立豆腐柴叶质量控制标准;通过体内外药效研究,阐释豆腐柴叶效应成分的抗炎作用。主要内容和结果如下:（1）基于UPLC-MS/MS的豆腐柴叶化学物质基础及内源性物质基础研究应用UPLC-MS/MS技术对豆腐柴叶提取物进行分析,建立提取物化学成分物质谱。采集豆腐柴叶提取物灌胃给药后的小鼠粪便与血浆,通过UPLC-MS/MS分析和鉴定豆腐柴叶提取物在小鼠体内的原型和代谢产物,建立内源性物质谱。在豆腐柴叶提取物中鉴定到50个化合物。在小鼠血浆中鉴定到原型及其代谢产物共27个,主要为酚酸类化合物和脂肪酸类化合物。在小鼠粪便中鉴定到原型成分和代谢产物共57个,主要为酚酸类化合物、脂肪酸类化合物和黄酮类化合物。（2）豆腐柴叶提取物中活性成分的定量及指纹图谱研究为构建豆腐柴质量控制标准,本研究利用HPLC技术建立了豆腐柴叶提取物的指纹图谱和指标成分定量方法。建立了针对4个指标性成分的HPLC定量方法,方法学考察结果表明该方法精密度、稳定性、重复性良好,在一定浓度范围内线性良好,灵敏度高,且准确性良好。建立了豆腐柴叶的指纹图谱,并对指纹图谱中10个典型特征峰进行了表征。（3）豆腐柴叶提取物抗炎作用的研究通过LPS刺激RAW264.7巨噬细胞建立炎症模型,应用豆腐柴叶提取物干预,检测其炎症因子水平。通过DSS诱导小鼠构建结肠炎模型,并给予豆腐柴叶提取物干预。通过小鼠体重变化、摄食量变化、便隐血、病理切片等途径评价其体内抗结肠炎药效作用。结果表明,豆腐柴叶提取物能够抑制RAW264.7细胞释放炎症因子,起到良好的抗炎效果。在DSS诱导的小鼠结肠炎模型中,检测了小鼠体重、摄食量和便血等指标。结果发现豆腐柴叶提取物能够减缓小鼠体重和摄食量的降低,并且能够缓和小鼠便血和腹泻等症状。组织切片的染色结果表明,豆腐柴叶提取物能够明显缓解DSS引起的组织损伤、隐窝破坏和杯状细胞减少等症状,表现出对结肠炎具有较好的治疗作用。
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