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商陆皂苷甲（esculentoside A,EsA）是中药商陆皂苷中含量最高的组分。近二十多年的研究表明EsA具有广泛的药理作用。本研究考察了EsA对自身免疫性模型小鼠的作用，并从抗炎机制和免疫调节机制的角度阐述了其作用机理，此外还利用基因芯片技术研究了EsA对小鼠胸腺细胞表达谱的影响，旨在从整体动物、细胞水平及分子水平上系统地阐明其作用机理。 自身免疫小鼠模型通过CJ—S131菌株辅以佐剂免疫而建立。EsA作用于模型小鼠后，发现EsA能够剂量依赖性地降低模型小鼠高水平的抗ds-DNA抗体及抑制T、B细胞的过度增殖。无论在有丝分裂原（ConA，LPS）存在或不存在的情况下，模型小鼠淋巴细胞增殖水平与正常小鼠相比都有大幅度的上升。在没有有丝分裂原刺激时，EsA在5、10、20mg／kg剂量下对模型小鼠的淋巴细胞增殖的抑制率分别为26％，33％，42％（P＜0.01）。在ConA刺激的情况下，中剂量的EsA将模型小鼠的淋巴细胞的异常增殖水平降至正常水平附近。而在LPS刺激的情况下，经20mg／kg EsA处理后，小鼠的淋巴细胞的增殖水平降至正常水平；抗双链DNA抗体在模型小鼠血清中的含量比正常小鼠血清中的含量有显著的增高（P＜0.01）。EsA能剂量依赖性地抑制模型小鼠的增高的抗双链DNA抗体水平。在20mg／kg EsA的治疗下，模型小鼠的增高的抗双链DNA抗体水平与正常水平接近。 内脏的病理切片表明EsA能改善肝、肾等内脏器官的炎症；骨关节病理切片表明EsA能够改善模型小鼠出现的类风湿性关节炎的三联征。另外模型小鼠的足肿情况也得到了较好的改善。说明EsA对自身免疫性小鼠模型确有疗效。模型小鼠肝脏肝细胞肿胀变性明显，有大量淋巴细胞多灶性浸润。经EsA治疗后，可见肝细胞变性不明显，灶性坏死部分吸收，散在炎症细胞浸润减少。模型小鼠肾小球体积明显增大，肾小球内炎症细胞明显增多，间质充血、出血明显，大量淋巴细胞浸润。经EsA治疗后，淋巴细胞浸润显著减少。随着剂量的增大，肾小球体积有所减小，炎症明显缓解。模型小鼠的骨关节病理切片显示：滑膜组织增生，滑膜下新生血管数量增多。血管通透性高，周围可见灶性炎症细胞渗出。血管翳向软骨表面侵蚀性生长，软骨明显受到侵蚀和破坏。随着EsA剂量的增大，关节炎症逐步得到了改善。滑膜组织增生减轻，血管翳减少，软骨破坏减少。20mg／kg EsA治疗后，血管翳几乎消失，可见光滑平整的软骨面。模型小鼠与正常小鼠相比，双侧后肢均有严重的肿胀。而且，左侧足跖（注射侧）比右侧足跖的肿胀程度高。EsA三个剂量组的小鼠后肢的肿胀程度在整个治疗 过程中均比模型小鼠低。模型小鼠的体重与正常小鼠相比无显著性差异。EsA 作用下，模型小鼠的体重也未有明显变化。 为了探讨ESA对自身兔疫性疾病的可能的药理作用机制，分别从抗炎和免 疫调节两个角度进行了研究。ESA能显著降低HUVEC304细胞对中性粒细胞的 粘附，抑制ICAM－lmRNA及蛋白的表达，阶低中性粒细胞CD18 mRNA的表 达水平。ESA对正常胸腺细胞的自发凋亡无影响，但却能加速COnd激活的小 鼠胸腺细胞凋亡。ESA对T细胞分泌的细胞囚子IFN1的分泌无明显影响；EsA 对正常的细胞状态下淋巴细胞分泌IL2无叨显影响，但对细胞激活状态下IL2 的分泌有抑制作用。结果提示ESA的免疫调节作用是非INFY途径的，与细胞 激活状态下IL2的分泌被抑制有关。 VEC304经LPS刺激后，对中性粒细胞的粘附明显增加，山16．silo．32％ 上升到32．36功卫4％。用kA TN处理Zh后，可叨显减少＊’S诱导的w汇304 对中性粒细胞的粘附。EsA的浓度为 10 mg／L时，LPS诱导的VEC304对中性 粒细胞的粘附率降到 20．3t0．52％；EVC 304细胞经 LPS刺激后，ICAMl 表达水平上升近两倍。这种上升的表达山于kA的加入而明显减弱。1妇A的浓 度为IO＊g儿时，抑制率达到了69．2％。。－！。性粒细胞经＊PS刺激门，＊D旧／卜 MG mRNA表达水平的比率由 0．872上升为 l．614。EsA的加入山显tdi弱了上升 的CD18 mRNA表达水平。EsA在2．5、5J 三个浓度F，CD18／D－MGmRNA 表达水平的比率分别为1．233，1刀氏0．952工VC 304细胞经uS刺激后，1＊＊M上 表达水平明显上升。ESA能够浓度依赖性地降低 LPS刺激下 EVC 304细胞ICAM —1蛋白的表达水平。EsA浓度为 10 mg／L时，ICAM—l蛋白表达水平降至正 常水平。 为了研究EsA对胸腺细胞的凋亡的影11向，分别进行了琼脂抓凝胜电泳、电 镜、流式细胞仪三方面的检测。结果显示有明显的＊＊AM状卅出观。电镜结 果显示：与胸腺细胞相比，Cond活化的胸腺细胞出现了明显的凋亡的形态学 改变：细 ］JbM缩、核染色质固缩、腆起泡。ESA )Jl入后，COn－A iffi化的胸腺细 胞凋亡有加速的趋势。利用FACS分析发现，小鼠胸腺细胞自身发