血红蛋白纳米微囊制备的初步研究

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血液是人体的重要组成部分,担负着运输氧气、二氧化碳和其它营养及代谢产物等维持人类生命的重要功能。由于血液的需求量迅速增加,而传统输血方式所致肝炎及艾滋病(AIDS)等血源性疾病的感染和传播,血液储存期短并需特殊设施和血源紧张等原因,寻找安全有效的血液代用品已成为目前世界范围的研究热点。采用可生物降解的高分子材料制备的血红蛋白纳米微囊是新一代的血液代用品,具有与天然红细胞相似的性质,是一种很有潜力的氧载体。本研究以聚乳酸(PLA)为囊材采用两种不同的方法制备血红蛋白纳米微囊作为血液代用品。研究内容主要分为三个部分:(1)采用离心加热法从新鲜牛血中提取和纯化血红蛋白。提得的血红蛋白产率在80%左右,纯度高于sigma公司生产的血红蛋白标准品,在98%左右。(2)采用超声复乳法制备血红蛋白纳米微囊。研究了囊材浓度、超声时间、超声强度、不同的有机溶剂,以及复乳过程中的脉冲等因素对成囊的粒径、包埋率和载药量的影响。研究发现,随有机相中囊材含量的增加,微囊粒径增大,同时包封率升高,载药量降低;随超声时间延长,超声频率提高,微囊粒径减小,但包封率、载药量随之下降;最终制得粒径为650nm左右,包封率为15%左右,载药量为20%左右的血红蛋白纳米微囊。(3)采用纳米沉积技术制备血红蛋白纳米微囊。研究了囊材浓度、反应温度、油水相比及搅拌速率等制备因素对成囊粒径、包埋率和载药量的影响。研究发现,随有机相中囊材含量的增加,微囊粒径增大,同时包封率升高,载药量降低;在将有机相加入水相的过程中磁力搅拌速度高,微囊粒径小,但包封率和载药量随之下降;随油相体积的减小,微球对BHb的包埋率、载药量与粒径均逐渐减小;最终制得粒径范围为120~150nm,包埋率为6%左右,载药量达到40%左右的血红蛋白纳米微囊。本研究工作主要是初步建立了血红蛋白纳米微囊的制备方法,并为以后的研究工作创造条件。
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