论文部分内容阅读
分子成像技术近年来已成为最有发展潜力的多学科综合的研究领域。新的肿瘤分子标志物的发现是肿瘤成像技术发展的关键。深入研究肿瘤靶向探针不仅有利于肿瘤早期诊断,而且更有助于肿瘤疗效的客观评价及肿瘤治疗策略的优化。近年来研究发现整合素在肿瘤血管新生过程中起着不可缺少的作用。利用RGD环肽和整合素的亲和性而制备的RGD修饰探针在肿瘤血管靶向成像中取得很好效果。一氧化氮(NO)信号分子在肿瘤的发生和迁移过程中同样具有非常重要的作用。我们实验室合成了一种NO荧光探针,可用于NO直接检测和成像[1,2],但是具有肿瘤靶向和NO测定双功能的荧光探针目前还未见任何报道。本论文首先设计并合成了N-{3-(2-苯基咪唑基)-4-羟基苯基}马来酰亚胺(HMPB),该化合物在常温下和具有巯基反应基团的环状RGD(RGDfC-SH)反应生成具有强荧光性质的探针RGDfC-HMPB。MDA-MB-231细胞整合素受体表达量高于MCF-7细胞,在这两种细胞中进行了RGDfC-HMPB与细胞整合素受体的亲和实验,荧光显微镜观察结果表明该探针与MDA-MB-231细胞结合能力明显高于MCF-7,进一步研究发现RGDfC-HMPB与MDA-MB-231细胞的亲和能力可被RGD竞争性抑制,充分表明该探针通过RGD配体的介导,靶向结合于细胞的整合素受体。此外,在4T1和S180荷瘤小鼠中研究了RGDfC-HMPB探针的体内分布,结果显示在尾静脉注射72h后,RGDfC-HMPB探针在肿瘤组织中荧光强度最大,提示该探针具有很好的肿瘤血管靶向性。我们将RGDfC-HMPB探针与Cu2+反应制备得到铜(Ⅱ)配合物RGDfC-HMPB-Cu,荧光光谱表征结果表明,铜(Ⅱ)配合物荧光萃灭,与NO反应后荧光重新恢复,提示铜(Ⅱ)配合物可被用于NO的检测。细胞实验结果表明铜(Ⅱ)配合物可以直接检测LPS刺激的RAW264.7细胞中产生的NO。最后,通过铜(Ⅱ)配合物在4T1荷瘤小鼠体内分布研究以及肿瘤组织中NO测定研究,表明铜(Ⅱ)配合物既能靶向肿瘤血管,同时又能有效检测肿瘤组织表达的NO。该双功能荧光探针研究为肿瘤成像探针的研发提供了新的思路,有望成为肿瘤早期诊断的有力工具。