微型月季的离体培养与试管开花研究

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利用组织培养的方法,研究微型月季(Rosa chinensis minima)的离体培养、试管开花以及花芽诱导过程中其内部生理生化的变化,建立微型月季的快速繁殖体系,缩短营养生长向生殖生长转变的时间,探讨花芽分化规律在理论上和应用上都具有重要的意义。本文研究了不同培养基,不同浓度的6-BA、NAA、AgNO3,不同的pH值以及封口膜对微型月季腋芽诱导的影响。研究发现,其中使用B5和MS培养基的发芽率都较低;使用1/2MS的发芽率最高,芽长得比较健壮,并且形成侧枝,最有利于微型月季快速繁殖的培养。不同浓度的6-BA和NAA对微型月季腋芽的诱导率差异性极显著。6-BA和NAA不同浓度的配比组合对腋芽诱导的影响也有很大的差别,当6-BA和NAA均为0.5mg/L的组合时,腋芽诱导率达到最高84.8%,芽的长势最好,发育的高度较高且整齐性好。培养基的pH值对微型月季腋芽诱导的影响差异性极显著,培养基过酸或过碱,都会影响腋芽诱导率,不利于芽的生长。当培养基的pH=5.8时,诱导率达到最高,芽的长势最好且发育长出许多叶子。不同浓度AgNO3对微型月季腋芽诱导的影响差异性显著,当AgNO3浓度为5.0 mg/L,芽的生长势较均匀一致,长势旺盛,有利于叶片数量生长分化。使用透气封口膜对微型月季的腋芽诱导效果很明显,芽生长速度快,利于植株枝条和叶片的旺盛生长和形成。本文重点研究了生根、愈伤组织、N/P含量、蔗糖、2-iP和ABA等对微型月季花芽诱导的影响。研究发现,植株生根明显抑制花芽诱导,其花芽诱导率只1.1%;是否分化愈伤组织对花芽诱导的影响不大。调整1/2MS中硝酸氨中的氮和磷含量,明显提高了花芽的诱导率,其中1N和5P配比下花芽诱导率最高。N和P配比还影响花的颜色深浅,植株和叶片的正常生长与否。在一定的范围内,培养基中蔗糖含量与花芽诱导率成正相关,过高的蔗糖含量会严重抑制花芽的诱导率。蔗糖含量为55mg/L时,花芽诱导率最高。此外,培养基中蔗糖含量与花的颜色也成正相关。在1/2MS培养基中单独添加不同浓度的2-iP或ABA,对微型月季的花芽诱导率影响不明显。综合以上花芽诱导较高的各种处理因素于一种培养基上,诱导率在第42d的时候已经达到34.4%左右,效果极显著。综合处理组的花芽诱导的时间短,诱导率高,但营养生长较差,有些嫩芽、嫩叶和新叶表现为紫红色或苍白。试管内的花颜色整体上比试管外的要浅许多。此外,本文还研究了微型月季花芽诱导过程中植株内部生理生化的变化和相关性。花芽诱导率高的处理,其可溶性蛋白质,可溶性总糖,N元素含量和P元素含量整体上明显高于花芽诱导的低处理。各生理生化的相关性分析得出,花芽诱导率与可溶性蛋白质含量,可溶性蛋白质含量与N元素含量,以及可溶性糖与N元素含量都是呈正相关性;花芽诱导率与P元素含量都是负相关;而N元素含量与P元素含量是呈不相关性。
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