在土荆芥挥发油作用下豌豆根边缘细胞对根尖的保护作用及机制研究

来源 :四川师范大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:itfwfp
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土荆芥(Chenopodium ambrosioides L.),为藜科藜属一年生或多年生草本植物,原产热带美洲,现已广泛分布于我国大部分地区,被列入《中国第二批入侵生物名单》。土荆芥对其周围植物种子萌发和幼苗生长具有较强的化感潜力,并具有一定的遗传毒性和细胞毒性。本研究室前期研究结果表明,受体植物的根边缘细胞对土荆芥的化感胁迫具有一定的缓解效应,但这种缓解效应的机制尚有待于进一步研究。为了探讨在土荆芥挥发油化感作用下,根边缘细胞对受体根尖的保护作用及其机制,本研究以豌豆(Pisum sativum L.)为受体,采用悬空气培养法,在分析豌豆根边缘细胞生物学特性的基础上,进一步在保留根边缘细胞和去除根边缘细胞的状态下,设置0μL、2μL、4μL、6μL、8μL和10μL6个挥发油处理剂量处理豌豆根尖,分析了豌豆根边缘细胞对土荆芥挥发油化感胁迫的缓解效应。结果如下:(1)当豌豆根尖生长约12mm时,根边缘细胞开始出现,其形状起初大多为近圆形,后逐渐变为近椭圆形、长条形、棒形和肾形。根长为25mm时,根边缘细胞数量达到最大值,约14000个,细胞活性保持在80%左右。(2)用不同剂量土荆芥挥发油分别处理豌豆根尖6h、12h和24h,研究了土荆芥挥发油对豌豆产生根边缘细胞的影响。结果表明:土荆芥挥发油对豌豆根边缘细胞具有致死效应,并且随着处理时间的延长和处理剂量的增加,这种效应加剧。较低剂量挥发油作用下,保留根边缘细胞组的死亡率比去除根边缘细胞组高,而较高剂量处理组则相反;与对照相比,随着处理剂量增加,各处理时间组的根边缘细胞总数量先增加后减少,根冠果胶甲基酯酶(Pectin Methyl Esterase,PME)活性则持续升高。保留根边缘细胞组中,根边缘细胞总数量减少的量较少,说明根边缘细胞能缓解土荆芥挥发油化感胁迫对其自身的影响;去除根边缘细胞组中,PME活性升高较多,表明土荆芥化感胁迫诱导了根边缘细胞的产生。(3)用不同剂量土荆芥挥发油分别处理豌豆根尖24h、48h和72h,研究了土荆芥挥发油对根尖细胞抗氧化系统的影响和遗传毒性,并分析了根边缘细胞对土荆芥挥发油化感胁迫的缓解效应。结果表明:土荆芥挥发油具有遗传毒性。在土荆芥挥发油作用下,豌豆根尖细胞有丝分裂过程受到明显的抑制。各处理时间组中,随着挥发油剂量增加,有丝分裂指数下降,微核率先增加后减少。与保留根边缘细胞处理相比,去除根边缘细胞处理的遗传毒性更为明显。保留根边缘细胞中,高剂量(10μL)72h时细胞有丝分裂指数约为低剂量(2μL)处理24h的70%,而去除根边缘细胞组则只有50%左右,表明根边缘细胞能缓解土荆芥挥发油诱导的遗传毒性;DNALadder分析表明,土荆芥挥发油未诱导豌豆根尖细胞凋亡;与对照相比,根尖MDA含量和SOD活性明显增加,POD活性和CAT活性明显下降。这些结果与挥发油剂量呈正相关。去除根边缘细胞的根尖与保留根边缘细胞的根尖相比,MDA含量较高,SOD活性较低,POD活性和CAT活性下降幅度更大;土荆芥挥发油抑制了豌豆幼根的生长,在去除根边缘细胞的情况下这种抑制效应更加明显。上述结果说明,根边缘细胞对根尖具有一定的保护效应。综上所述,土荆芥挥发油具有诱导根边缘细胞产生的作用,并导致根尖分生区细胞出现氧化损伤和遗传损伤,抑制了植物根的生长发育。根边缘细胞对土荆芥挥发油的化感胁迫具有一定的缓解效应。
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