E-Hsp70通过p-Stat3途径介导的髄源抑制细胞(MDSCs)免疫抑制活性

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目的:证实E-Hsp70通过p-Stat3途径介导的髓源抑制细胞(MDSCs)的免疫抑制活性方法:用蔗糖重水密度梯度及超速离心分离纯化小鼠肾癌细胞(Renca细胞)分泌的exosomes;透射电镜形态学分析以及Western blotting进行鉴定;流式细胞仪(flow cytometry, FCM)检测MDSCs匕例;ELISA检测IL-6和VEGF分泌;小鼠皮下成瘤实验观察MDSCs促肿瘤生长作用。RT-PCR和Western blotting检测Arg-1和iNOS mRNA和蛋白的表达;Western blotting检测p-STAT3、TLR2和MyD88的表达。结果:成功分离并纯化得到Renca细胞分泌的exosomes,Western blotting检测其高表达Hsp70(E-Hsp70)。E-Hsp70较对照组更能促进MDSCs扩增及活化(P<0.05)。与对照组相比,实验组MDSCs比例明显升高,IL-6和VEGF水平显著增加,促肿瘤生长更明显(P<0.05);Arg-1和iNOS mRNA和蛋白的表达均上调(P<0.05);p-Stat3、TLR2和MyD88的表达也上调(P<0.05)。结论:小鼠肾癌细胞(Renca细胞)分泌的exosomes显著促使MDSCs细胞扩增、活化,促进肿瘤生长。研究MDSCs的免疫抑制调节的信号途径,可为疾病的治疗寻找到行之有效的新靶点。
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