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目的:桥本氏甲状腺炎(Hashimoto’s thyroiditis,HT)的病理特点是大量的免疫活性细胞浸润甲状腺组织以及机体异常识别自身抗原发生免疫应答,导致甲状腺组织肿大、纤维化和甲状腺结构完整性破坏,最终导致甲状腺功能紊乱。本文旨在探讨人髓样相关蛋白14(Myeloid-Related Protein14,MRP14)是否通过调节趋化因子的表达参与桥本氏甲状腺炎淋巴细胞的浸润,以及IL-1β对MRP14的调控作用及分子机制,阐明IL-1β、MRP14在淋巴细胞浸润机制中的作用,为HT治疗提供潜在的干预靶点。方法:1.免疫组织化学法检测MRP8/MRP14、MRP14在单纯性甲状腺结节组织(作为正常对照)、桥本氏甲状腺炎组织及甲状腺乳头状癌组织中的表达情况。2.收集健康体检者的血清标本和桥本氏甲状腺炎患者的血清标本各20例,采用蛋白浓缩法浓缩蛋白,随后用免疫印迹法测定血清中MRP14的水平。3.分别用不同浓度IL-1β(0、10、20、50 ng/mL),TGF-β(0、10、20、40、80 ng/mL)和TNF-α(0、1、10、20、40、60 ng/mL)处理甲状腺滤泡上皮细胞系Nthy-ori 3-1细胞及甲状腺乳头状癌细胞系TPC-1细胞4 h后,用荧光定量PCR的方法检测MRP14 mRNA的表达水平。4.IL-1β(20 ng/mL)单独处理Nthy-ori 3-1细胞不同时间(0、0.5、1、6、12 h)后,用细胞免疫荧光的方法检测MRP14的表达变化。5.免疫组织化学法检测单纯性甲状腺结节患者(作为正常对照)和桥本氏甲状腺炎患者甲状腺组织中IL-1β的表达情况。6.IL-1β(20 ng/mL)处理Nthy-ori 3-1细胞不同时间(0、8、15、20、60 min)后,免疫印迹的方法检测MAPK/NF-κB信号通路中p-P38/P38、p-JNK/JNK、p-ERK/ERK、p-P65/P65和p-IκBa/IκBa蛋白的表达变化。7.IL-1β(20 ng/mL)处理Nthy-ori 3-1细胞不同时间后,用荧光定量PCR方法检测趋化因子mRNA的表达水平。8.si RNA-MRP14小干扰转染Nthy-ori 3-1细胞48 h后,用荧光定量PCR方法检测趋化因子mRNA的表达水平。9.用MRP14过表达质粒(pc DNA3.1 MRP14)转染Nthy-ori 3-1细胞48 h后,用荧光定量PCR方法检测趋化因子mRNA的表达水平。结果:1.与正常对照组和甲状腺乳头状癌组相比,桥本氏甲状腺炎患者甲状腺组织中MRP14的表达水平明显增加,而MRP8/MRP14表达没有明显差异。2.与健康体检组相比,桥本氏甲状腺患者血清中MRP14表达量明显增加。3.与未处理组相比,不同浓度的IL-1β处理甲状腺滤泡上皮细胞,能够明显促进MRP14 mRNA的表达,且以20 ng/mL浓度的IL-1β诱导MRP14 mRNA表达增高最明显。而不同浓度的TGF-β和TNF-α处理甲状腺滤泡上皮细胞,并不能促进MRP14 mRNA的表达;不同浓度IL-1β、TGF-β和TNF-α处理甲状腺乳头状癌细胞TPC-1,均不能促进MRP14 mRNA的表达。4.与未处理组相比,用IL-1β(20 ng/mL)处理Nthy-ori 3-1细胞于不同时间,MRP14蛋白表达增加,在1 h时最为明显。5.与正常对照组相比,桥本氏甲状腺炎患者甲状腺组织中IL-1β的表达量显著升高。6.IL-1β(20 ng/mL)处理Nthy-ori 3-1细胞于不同时间后,IL-1β能显著的促进MAPK/NF-κB信号通路中p-P38/P38、p-JNK/JNK、p-ERK/ERK、p-P65/P65和p-IκBa/IκBa的表达。7.与未处理组相比,IL-1β(20 ng/mL)处理Nthy-ori 3-1细胞4 h后,趋化因子GRO-2、CXCL9及CCL22的mRNA表达水平明显增加-。8.用si RNA-MRP14干扰Nthy-ori 3-1细胞48 h后,趋化因子GRO-2、CXCL9及CCL22的mRNA表达水平明显下降。9.用MRP14过表达质粒(pc DNA3.1 MRP14)转染Nthy-ori 3-1细胞48 h后,趋化因子GRO-2、CXCL9及CCL22的mRNA表达水平明显升高。结论:HT患者的甲状腺组织中MRP14、炎症因子IL-1β表达显著升高,且HT患者血清标本中MRP14的表达量亦明显增加。细胞实验证明,IL-1β通过活化MAPK/NF-κB信号通路引起MRP14 mRNA水平和蛋白水平的表达上调。IL-1β能够促进甲状腺滤泡上皮细胞趋化因子GRO-2、CXCL9及CCL22的分泌,抑制MRP14的表达可以抑制GRO-2、CXCL9及CCL22的表达,而过表达MRP14能够促进趋化因子GRO-2、CXCL9及CCL22的表达。上述结果证明IL-1β通过MAPK/NF-κB信号通路调节甲状腺滤泡上皮细胞MRP14的表达,进而影响了下游趋化因子GRO-2、CXCL9及CCL22的表达。证实了MRP14可能通过调节甲状腺滤泡上皮细胞趋化因子的分泌参与桥本氏甲状腺炎的致病过程。