论文部分内容阅读
目的:急性肝衰竭(ALF)起病急,自然死亡率高,目前最有效的治疗是原位肝脏移植,但由于供肝短缺,等待肝移植的患者越来越多,许多患者在等待移植期间死亡,这促进了广大学者探索治疗ALF新的方法。而肝细胞移植(HCT)被公认为继肝移植后一项有效、安全而有希望的治疗方法,动物实验表明脾实质内移植为最有效的移植途径,但临床脾内移植手术风险大,在临床应用中受到限制。本研究拟探讨同种异体肝细胞腹腔内移植联合ALR治疗大鼠ALF的疗效,及ALR在同种异体HCT免疫应答中的作用及其机制。方法:采用半原位胶原酶灌注法分离成年SD大鼠肝细胞用以移植。用1.0g/kg的D-gal诱导SD大鼠ALF,诱导后24h,74只ALF大鼠随机分成5组,除Ⅴ组14只外,其余组各15只。Ⅰ组:注射生理盐水;Ⅱ组:移植2×107肝细胞,以后注射生理盐水;Ⅲ组:移植2×107肝细胞,联合CsA10mg.kg-1.d-1;Ⅳ组:移植2×107肝细胞,同时注射ALR50μg.kg-1.d-1;Ⅴ组:注射ALR50μg.kg-1.d-1;肝细胞和药物均腹腔内注射。观察大鼠的存活率、肝脏功能、移植肝细胞存活情况、病理变化,检测各组大鼠CD4、CD8、CD68、IL-1β、TNF-α的水平。结果:各组间大鼠2周存活率两两比较,Ⅳ组存活率显著高于Ⅰ组(66.7% vs 0%,P=0.001),余组间无差异。药物诱导后2-3天血清生化指标水平达高峰,各组间无差异。但d1-2腹水生化指标有差异,Ⅲ组ALT水平高于Ⅰ、Ⅳ、Ⅴ组;Ⅱ、Ⅲ组AST水平均高于Ⅳ、Ⅴ组,Ⅰ组高于Ⅳ组;Ⅰ组TBil低于Ⅱ、Ⅳ组。移植后第14天生化指标恢复正常。移植后d1-2血清TNF-α水平Ⅰ、Ⅱ组均高于Ⅳ组、Ⅴ组,Ⅲ组高于Ⅴ组;Ⅳ组d1-2血清IL-1β低于Ⅱ组;d1-2腹水TNF-α、IL-1βⅡ组均高于其它组。d1-2大网膜CD68阳性率Ⅱ组高于Ⅰ、Ⅳ组;肝细胞结节内CD68阳性率Ⅳ组低于Ⅱ、Ⅲ组。移植后大网膜d1-2 CD4、CD8阳性率Ⅰ、Ⅱ组均高于Ⅳ、Ⅴ组,且Ⅱ组CD4阳性率高于Ⅲ组。各存活组间d14各项指标均无差异。结论:肝细胞腹腔内移植联合ALR能提高ALF大鼠存活率。ALR通过降低血清及腹腔内TNF-α、IL-1β水平,抑制CD4+/CD8+T细胞、单核-吞噬细胞介导的免疫应答,而促进移植肝细胞存活和增殖,改善肝脏功能及组织学变化。