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近年来,量子点作为一种新型的无机纳米荧光材料被广泛应用于生物和医学领域,在细胞标记、生物分子检测、免疫分析等方面都取得了许多重要成果。与传统有机荧光染料相比,量子点具有激发光谱宽而连续、发射光谱窄而对称、抗光漂白性强、荧光强度高等显著优点。量子点的研究已经成为一门新兴的交叉学科,成为纳米材料学和纳米生物医学领域新的研究热点。
本文的主要研究工作归纳如下:
(1)以二巯基辛酸(DHLA)为修饰原料,在前人报道方法上加以改进,基于双巯基与量子点表面金属原子的螯合作用实现油溶性量子点的水溶性修饰,得到的水溶性量子点各种荧光性能优良。同时进一步考察了无机金属离子对这种二巯基辛酸修饰量子点的荧光猝灭行为,并对有关作用机理进行了探讨。
(2)利用1—乙基-3—(3—二甲基氨丙基)一碳化二亚胺(EDC)和N—羟基琥珀酰亚胺(NHS)将水溶性QDs与牛血清白蛋白(BSA)共价偶联到一起。QDs与BSA结合后荧光强度增强,这主要是因为蛋白将QDs表面包覆后有效去除了表面缺陷,使荧光强度明显提高。产物(BSA—QDs)对Cu2+有较强响应,这为其用于检测环境中的Cu2+提供了可能。利用镍柱得到高纯度正常型朊蛋白(PrpC),并根据二巯基辛酸修饰的水溶性CdSe/ZnS量子点表面Zn与组氨酸的特异性结合,对PrPC进行标记。利用荧光分光光度计和琼脂糖凝胶电泳两种方法进行验证。
(3)发现朊蛋白自身在670nm处有较强荧光,且荧光强度与其浓度在一定范围内呈线性。用这种方法测定朊蛋白浓度简单、快速、灵敏。同时对荧光来源进行推理并一一验证,最后推测导致朊蛋白有荧光的原因是,朊蛋白中的色氨酸与细菌中荧光小分子血卟啉发生荧光共振能量转移。