目的构建烧伤后中性粒细胞体外黏附迁移模型和滞留组织模型,观察中性粒细胞体外黏附迁移、滞留后蛋白质组的变化,寻找烧伤炎症的分子标志,进一步揭示中性粒细胞在烧伤后炎症反应中的病理生理机制,探讨烧伤脓毒症的发病机理。方法采集健康志愿者外周血(分离中性粒细胞和正常血清)、特重度烧伤患者血清和Ⅱ°烧伤创面水泡液,运用Transwell建立中性粒细胞(Polymorphonuclear neutrophils,PMN)与人脐静脉血管内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)体外黏附迁移模型,并将黏附迁移后的中性粒细胞在烧伤水泡液中培养建立滞留模型,收集黏附迁移后和滞留后中性粒细胞,以健康志愿者中性粒细胞做对照,进行固相pH梯度(IPG)SDS-PAGE二维凝胶电泳(2-DE)、应用PDQuest软件筛选差异表达蛋白点、辅助激光解析电离飞行时间质谱(MADI-TOF-MS)分析获取肽质量指纹图谱(PMF),Mascot查询软件搜索NCBI、MSDB和SWISS-PROT数据库,鉴定特征性差异表达蛋白。结果黏附迁移、滞留后中性粒细胞蛋白质组发生了明显变化,发现33个显著差异表达的蛋白点,鉴定出22个蛋白点16种蛋白质,包括前纤维蛋白-1、肌动蛋白、热休克蛋白70、肽脯氨酰顺反异构酶A、中性粒细胞弹性蛋白酶抑制剂、果糖二磷酸醛缩酶、过氧化氢酶、α-烯醇化酶、波形蛋白、微管蛋白β链、乳铁传递蛋白、氯离子通道蛋白-1、三磷酸甘油醛、DJ-1蛋白,S100-A9蛋白。结论1)初步建立了人中性粒细胞与血管内皮细胞体外黏附迁移、滞留模型。2)建立了图像清晰、分辨率较高的人中性粒细胞体外黏附迁移及滞留后2-DE图谱。3)人中性粒细胞体外黏附迁移及滞留后蛋白质组发生了明显变化,差异表达蛋白质可能在烧伤后炎症失控、免疫紊乱、细胞凋亡延迟、血管通透性增加中起一定作用。