弓形虫ROP2基因在大肠杆菌和卡介苗中的表达及免疫原性的研究

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弓形虫(Toxoplasma gondii)为专性细胞内寄生原虫,全球分布,能引起人兽共患的弓形虫病,由于弓形虫生活史复杂,传播途径多样,对弓形虫病的治疗,特别是消灭弓形虫的包囊,迄今尚未有效的药物。因此弓形虫病疫苗的研究已成为弓形虫病防治工作的重点。ROP2 蛋白为弓形虫生活史各期均分泌的抗原,具有高度的保守性和免疫反应性,已成为弓形虫病疫苗研究的候选分子。为了探讨重组卡介苗对弓形虫感染的免疫保护作用,进行了以下研究:1.ROP2 基因在大肠杆菌中的表达及免疫原性分析;2.分别构建了大肠杆菌-卡介苗穿梭表达载体pMV262-ROP2 和整合表达载体pOIP23H-ROP2,转化的重组卡介苗可诱导表达ROP2 重组蛋白。3.动物免疫保护试验,将重组卡介苗分别经静脉注射和口服两种免疫途径免疫BALB/c 小鼠,脾脏单个核细胞培养上清IFN-γ、IL-2 及CD4+、CD8+T 细胞较对照组都有不同程度的提高,与对照组比较差异显著,体现了Th1 型细胞免疫的特征。重组卡介苗(rBCG:pMV262-ROP2)静脉途径免疫的小鼠较对照组生存时间延长(p<0.05)。本研究为研制高效的弓形虫基因重组卡介苗疫苗奠定了基础。
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