大鼠弥漫性轴索损伤后microRNA的表达和检测

来源 :浙江大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cs_200901
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目的:检测大鼠弥漫性轴索损伤后microRNA(miRNA)在轴索损伤位点的表达。方法:雄性SD大鼠9只,其中6只采用Marmarou方法制作大鼠DAI模型,分别于伤后1天和7天各取3只,断头取脑,分离新皮层、海马和脑干,对照组3只进行假手术操作而不打击,同样取出上述脑组织。提取出总RNA之后,采用miRNA芯片技术检测各组织中miRNA表达谱的变化,并利用TargetScan (Release6.2)、Pictar和miR Base进行逆向检索,分析与靶基因相关的miRNA的表达变化。结果:在新皮层中,伤后1天表达显著上调(大于1.5倍,下同)的miRNA有19个,表达显著下调(大于1.5倍,下同)的miRNA有79个,伤后7天表达显著上调的有146个,表达显著下调的有115个;在海马组织中,伤后1天表达显著上调的miRNA有195个,表达显著下调的有87个,伤后7天表达显著上调的有48个,表达显著下调的有70个;在脑干组织中,伤后1天表达显著上调的miRNA有142个,表达显著下调的有115个,伤后7天表达显著上调的有101个,表达显著下调的有145个。进一步对比研究表明,DAI后1天及7天,在新皮层组织中表达均上调miRNA有6个,表达均下调的miRNA有34个;在海马组织中表达均上调miRNA有15个,表达均下调的miRNA有25个;在脑干组织中,表达均上调的miRNA有30个,表达均下调的miRNA有41个。通过逆向检索发现,与CAPN2相关的miRNA-190b、与CASP3相关的miRNA-let-7a、 miRNA-let-7b、miRNA-let-7c、miRNA-let-7d、miRNA-let-7i、miRNA-let-7f以及与CASP7相关的miRNA-23a在DAI后表达有显著变化,其中miRNA-let-7a、 miRNA-let-7c及miRNA-23a在DAI后1天时在大鼠新皮层、海马及脑于组织中均有显著变化。结论:DAI后在大鼠新皮层、海马及脑干组织中存在广泛的miRNA表达谱的变化;miRNA-let-7a、miRNA-let-7c及miRNA-23a可能通过其靶基因影响DAI后的继发性轴突断裂。
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