大蒜是一种常用的药食两用的中药材,医学研究表明,大蒜具有抗菌、抗病毒、抗真菌与增强免疫等多种功效。大蒜多糖（Garlic polysaccharide,GPS）是从大蒜鳞茎中提取的主要活性成分,具有增强免疫、抗氧化、抗病毒、抗炎、抗肿瘤、保肝等多种生物活性。硒是人类和动物必不可少的微量元素,具有突出的抗氧化和增强免疫作用,对维持机体健康十分重要。硒多糖不仅兼有硒和多糖的优点,而且还具备硒多糖所特有的生物活性。因此,本研究选用亚硒酸钠作为硒源,对GPS进行硒化修饰,考察硒化大蒜多糖（Selenized Garlic Polysaccharide,sGPS）对雏鸡生长性能及新城疫（Newcastle diseases,ND）疫苗免疫保护效果的影响,为临床应用提供参考依据。1 硒化大蒜多糖制备及其制备条件的优化首先,将大蒜研磨碎并采用水提醇沉法提取大蒜粗多糖（Crude garlic polysaccharide,cGPS）,冷冻干燥,再用三氯乙酸法除去cGPS中的蛋白质,再经冷冻干燥,得纯化的GPS。硒化修饰采用硝酸-亚硒酸钠（HNO3-Na2SeO3）法,分别以亚硒酸钠的用量、反应温度和反应时间三因素、三水平设计正交试验,以优化硒化修饰条件,得到9种硒化大蒜多糖sGPS1～sGPS9。用苯酚-硫酸法测定多糖的糖含量,用电感耦合等离子质谱仪测定sGPS硒含量。结果显示,cGPS的糖含量为72.03%,GPS的糖含量95.26%。硒化大蒜多糖中,sGPS2的得率最高,为 31.33%,其次为 sGPS6、sGPS1、sGPS4;sGPS6 的硒含量最高,为 38.27 mg/g,其次为sGPS9、sGPS5、sGPS8。根据正交试验筛选,影响sGPS硒含量的因素:温度>亚硒酸钠质量>时间,故sGPS6的硒化方案最优:GPS:500 mg;水浴温度:70℃;亚硒酸钠:400mg;反应时间:6h。2 硒化大蒜多糖的表征本试验旨在对sGPS的化学结构、形态特征及热稳定性等进行评价。红外光谱法（IR）检测结果显示,sGPS分别在1064.56 cm-1和856.87 cm-1处出现了硒酸酯和亚硒酸酯的特征性吸收峰;固体核磁共振（SS-NRM）结果表明,sGPS C1、C5、C3、C2与C6的化学位移发生了改变,这些化学位移的变化与其它硒多糖的变化一致;扫描电镜（SEM）观察多糖表面形态,发现sGPS具有硒多糖表面粗糙且有球状凸起的特征性结构;透射电镜（TEM）分析发现,sGPS具有微小球形硒颗粒的结构特征。以上结果表明,GPS被成功硒化。X射线衍射（XRD）分析多糖结晶度发现,GPS较sGPS有更多结晶体,与SEM、TEM所显示sGPS结构聚集的结果相吻合。热重分析仪（TGA）分析发现,sGPS的热重比高于GPS,表明硒化修饰提高了多糖的热稳定性。3 硒化大蒜多糖对雏鸡生长性能和血液生化指标的影响30只1日龄未免疫雌性绿壳蛋鸡适应性饲养14 d后,随机分成5组,空白组口服0.5 mL生理盐水,多糖组分别口服0.5 mL sGPS（4mg/kg、8mg/kg、16 mg/kg）和GPS（16mg/kg）,连续给药7d。每天观察鸡的精神状态与生长状况,通过平均日增重（ADG）、肝脏指数和血清生化指标等来判定sGPS对雏鸡的潜在作用。结果表明,各组鸡精神状态良好,sGPS-8、sGPS-16组鸡ADG显著高于空白对照组（P<0.05）;剖检心、肝、脾、肾等脏器组织未见明显异常;各组血清生化指标与空白组无明显差异。这表明,受试剂量的sGPS对雏鸡具有促生长作用,且有较好的安全性。4 硒化大蒜多糖对鸡新城疫疫苗免疫效果的影响1日龄未免疫雌性绿壳蛋雏鸡适应性饲养至14 d,选择180只健康鸡随机分成6组,每组30只鸡。除空白对照组（Con）外,其余各组均用鸡新城疫（ND）疫苗进行免疫,28日龄进行二免。疫苗接种的同时,四个多糖组分别口服0.5 mL sGPS（4 mg/kg、8 mg/kg、16 mg/kg）和 GPS（16 mg/kg）,疫苗组（Vac）和Con组均口服等量的生理盐水,连续给药5 d。记录分析鸡在14～28 d与29～42 d试验期间内ADG的变化,同时分析21、28、35、42 d血清抗体效价与空肠、气管sIgA、IFN-γ和IL-2的含量。结果显示,ADG的变化与sGPS呈剂量依赖性,表明sGPS具有促生长作用;sGPS作为疫苗佐剂可以显著提高鸡ND血清抗体效价,并能促进空肠、气管sIgA、IFN-γ和IL-2的分泌而提高黏膜免疫。