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组织滴虫病(Histomoniasis)是由单尾滴虫科毛滴虫属的单细胞火鸡组织滴虫(Histomonas meleagridis,H.meleagridis)引起的鸡形目禽类的一种原虫病,以肝脏坏死、盲肠肿大和排硫磺样粪便为主要特征。火鸡、鸡、鹌鹑和孔雀是该病的易感动物,会导致火鸡的高发病率和死亡率。基于食品安全与人类健康,防控组织滴虫病的有效化学药物大多已被禁用,而该病又缺乏有效的疫苗,导致该病流行日益严重。随着我国养禽业的不断发展,该病在我国很多地区有不同程度发生,部分鸡群死亡率达到20-30%,且不同种类鸡群中该病的发病率和死亡率存在一定的差异,给养禽业造成了巨大危害。本研究首先对临床疑似病例脏器进行了火鸡组织滴虫的检测;分离和比较了两株虫株的致病力;在此基础上,选用4个不同品种鸡(芦花鸡、来航鸡、海兰褐蛋鸡、黄羽肉鸡)和火鸡为研究对象,以人工分离培养的火鸡组织滴虫JSYZ-F株经泄殖腔途径感染,分析比较感染后各品种鸡和火鸡体内的发病过程以及细胞因子水平差异,主要内容如下:1.临床疑似病例中火鸡组织滴虫的检测与脏器分布为了探明临床病鸡中火鸡组织滴虫的脏器分布规律,从扬州大学动物医院收集了 21例临床疑似病鸡的321个组织器官,以火鸡组织滴虫18S RNA基因为靶基因,采用PCR技术对样品中的虫体DNA进行了检测。结果表明:组织脏器中肝脏和盲肠的阳性检出率最高,分别为57.1%和52.4%;其次为回肠、脾脏、肾脏、肌胃、胰腺和脑,阳性率分别为43.8%、40.0%、40.0%、37.5%、35.7%和33.3%;心脏、肺脏、法氏囊和其他肠道组织等检出率较低;胆囊未检测到。临床病料中火鸡组织滴虫主要感染靶器官肝脏和盲肠,其次为回肠、脾脏、肾脏、肌胃、胰腺和脑,其他脏器虫体分布较少。2.火鸡组织滴虫JSYZ-F株和JSYZ-G株的致病力比较应用本实验室分离培养的两株火鸡组织滴虫单克隆虫株JSYZ-F株和JSYZ-G株,对15日龄的海兰褐蛋鸡进行泄殖腔感染,比较了其致病力的差异。海兰褐蛋鸡随机分成三组,一组为阴性对照组,另外两组分别感染两株火鸡组织滴虫单克隆虫株,感染剂量为2×105个虫体/羽。感染后第15 d对鸡进行扑杀称重,并对各组鸡的发病率、死亡率、相对体重率、肝脏和盲肠病变计分进行统计学分析,比较两株单克隆虫株的致病力。结果显示,JSYZ-F株与JSYZ-G株相比发病后症状更典型,两者相对增重率分别为71.7%和77.9%,肝脏病变计分平均值分别为0.6和0.3,盲肠病变计分平均值分别为2.5和1.8。不同地区分离得到的火鸡组织滴虫单克隆虫株致病力存在一定差异,单克隆培养的火鸡组织滴虫JSYZ-F株的致病力较JSYZ-G株稍强。3.不同品种鸡及火鸡对火鸡组织滴虫的易感性比较采用火鸡组织滴虫JSYZ-F株通过泄殖腔途径感染不同品种禽并每隔5d(5、10、15、20、25 d)定期扑杀,观察各品种禽的发病率与死亡率、平均体重、大体病理变化、肝脏与盲肠病变计分、肝脏与盲肠组织病理学、虫体在体内的动态分布和细胞因子等多个指标或变化,比较分析了芦花鸡、来航鸡、黄羽肉鸡、海兰褐蛋鸡及火鸡对火鸡组织滴虫的易感性差异。结果表明:发病率和死亡率由高到低依次为火鸡、来航鸡、芦花鸡、海兰褐蛋鸡和黄羽肉鸡,其中火鸡发病率高达100%,死亡率为90%。感染5 d时对火鸡体重影响最大,与对照组差异显著(p<0.05),其他组无显现差异,感染后其他时间点各品种禽体重与对照组均存在显著或极显著差异。肝脏与盲肠病变计分5-25 d内呈现先升高后再下降的趋势,10-15 d最高,各组病变计分值由高到低依次为火鸡、来航鸡、芦花鸡、海兰褐蛋鸡和黄羽肉鸡。肝脏组织病理学变化主要表现为肝细胞变性坏死、肝索紊乱,细胞核溶解或萎缩、大量巨噬细胞、淋巴细胞还有异嗜性细胞浸润,肝组织内有大量的虫体;盲肠组织病理学变化主要表现为盲肠上皮细胞坏死脱落,黏膜固有层有大量均质红染的火鸡组织滴虫出现,肌层充血,有不同程度的炎性细胞浸润;各时间点肝脏与盲肠的组织病理学变化严重程度与各组禽发病率和死亡率高度一致。虫体在各脏器内检出率的分布结果表明,感染后不同时间点,各组脏器中均以肝脏和盲肠检出率最高,其次是肠道组织、脾脏、肾脏、肺脏、心脏,胰腺、胸腺、法氏囊、生殖器官检出率较低,各时间点脏器的检出率高低与各品种禽发病率和死亡率高低保持一致。细胞因子水平检测结果表明:火鸡IFN-γ水平在感染后5-10 d明显高于其他品种鸡,15 d后明显下降,其他品种鸡IFN-γ在感染后5-20 d升高,25 d时开始下降,与发病率和死亡率无明显相关性;IL-2、IL-4水平变化无明显规律;各品种鸡及火鸡组间组内的IL-10水平基本一致,未见明显上升或下降;细胞因子水平与品种易感性无明显相关性。综上所述,不同品种鸡及火鸡对火鸡组织滴虫的易感性高低依次为火鸡、来航鸡、芦花鸡、海兰褐蛋鸡和黄羽肉鸡,上述研究进一步探索了该病的发病机制,为组织滴虫病药物和疫苗研制的动物模型的选择提供了一定的参考,也为组织滴虫病的防控提供了新的思路。