【摘 要】
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目的:本实验旨在通过气管内注入脂多糖（LPS）联合烟熏复合方法,复制慢性阻塞性肺疾病（COPD）大鼠模型,采用ELISA、RT-PCR方法检测COPD模型大鼠血清、支气管肺泡灌洗液（BALF）中IL-8、IL-17、IL-10含量及肺组织中MUC5AC m RNA表达水平,观察清肺化痰汤干预后COPD模型大鼠血清、BALF中IL-8、IL-17、IL-10含量及肺组织中MUC5AC m RNA表达
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目的:本实验旨在通过气管内注入脂多糖（LPS）联合烟熏复合方法,复制慢性阻塞性肺疾病（COPD）大鼠模型,采用ELISA、RT-PCR方法检测COPD模型大鼠血清、支气管肺泡灌洗液（BALF）中IL-8、IL-17、IL-10含量及肺组织中MUC5AC m RNA表达水平,观察清肺化痰汤干预后COPD模型大鼠血清、BALF中IL-8、IL-17、IL-10含量及肺组织中MUC5AC m RNA表达水平的变化,从气道炎症和气道黏液高分泌方面探讨清肺化痰汤的作用,为中医药在临床上治疗COPD患者提供实验依据。方法:1.制备COPD大鼠模型将鼠龄为7周、体重为（200±20）g的60只SPF级Wistar雄性大鼠,随机分成6组,A组为正常组,B组为模型组,C组为清肺化痰汤低剂量组,D组为清肺化痰汤中剂量组,E组为清肺化痰汤高剂量组,F组为罗红霉素组,10只/组。实验前将6组大鼠均置于实验环境中适应性饲养1周,自由饮水、摄食。适应性饲养1周后A组按常规饲养,不予干预,其余各组按气管内注入LPS联合烟熏复合造模法造模,在实验的第1、14天往大鼠气管内滴入LPS,第2-13、15-28天于自制烟熏箱内予香烟烟熏建立COPD大鼠模型,第29天B、C、D、E、F组各处死1只大鼠取肺组织行病理检查,以确认造模是否成功。2.罗红霉素、清肺化痰汤药物干预A组、B组予10ml/（kg·d）生理盐水灌胃,C、D、E组分别予5.69g/（kg·d）、11.37g/（kg·d）、22.74g/（kg·d）清肺化痰汤灌胃,F组予30.45mg/（kg·d）罗红霉素灌胃,连续灌胃给药14天。3.标本采集、检测给药14天后,采取同一方法收集各组大鼠的标本:大鼠麻醉后,于腹主动脉采取血液标本、左肺收集BALF以及右肺收集肺组织。标本收集完毕后,用光学显微镜观察大鼠肺组织病理改变,左肺BALF及血液离心后血清采用ELISA法测定IL-8、IL-17、IL-10含量,右肺组织以RT-PCR方法检测MUC5AC m RNA表达水平。结果:1.大鼠模型制备:根据大鼠咳嗽、痰鸣音、口鼻分泌物以及毛发、活动状态等一般情况表现,符合COPD表现,用光学显微镜观察右肺组织,除A组不符合COPD病理学改变外,其余各组均符合COPD病理学改变。2.肺组织炎症病理评分结果:（1）与A组比较,B组肺组织炎症病理反应明显升高,P＜0.05。（2）与B组比较,C、D、E、F组肺组织炎症病理反应减轻,P＜0.05。（3）与C组比较,D组肺组织炎症病理改变不明显,P＞0.05;E组肺组织炎症病理改变明显减轻,P＜0.05。（4）与D组比较,E组肺组织炎症病理改变明显减轻,P＜0.05。（5）与E组比较,F组肺组织炎症病理改变不明显,P＞0.05,差异无统计学意义。3.药物干预结果:（1）与A组比较,B组血清和BALF中IL-8、IL-17含量及肺组织MUC5AC m RNA表达水平显著升高,而血清及BALF中IL-10含量明显减少,P＜0.05。（2）与B组相比,C、D、E、F组血清和BALF中IL-8、IL-17含量及肺组织MUC5AC m RNA表达水平均降低,血清和BALF中IL-10含量增加,P＜0.05。（3）与C组比较,D、E组血清和BALF中IL-8、IL-17含量及肺组织MUC5AC m RNA表达减少,血清和BALF中IL-10含量增加,P＜0.05。（4）与D组比较,E组血清和BALF中IL-8、IL-17含量及肺组织MUC5AC m RNA表达减少,血清和BALF中IL-10含量增加,P＜0.05。（5）与E组比较,F组血清和BALF中IL-8、IL-17、IL-10含量及肺组织MUC5AC m RNA表达改变不明显,P＞0.05。（6）E、F组与A组相比,大鼠血清和BALF中IL-8、IL-17、IL-10及肺组织MUC5AC m RNA的表达水平差异有统计学意义（P＜0.05）。结论:1、气管内注入LPS联合烟熏复合造模法能成功复制COPD大鼠模型。2、清肺化痰汤能降低COPD模型大鼠血清和BALF中IL-8、IL-17炎症因子的含量,提高血清和BALF中IL-10抑炎介质的含量,下调肺组织MUC5AC m RNA表达水平,从而减轻气道炎症反应和气道黏液高分泌状态,改善COPD模型大鼠肺组织病理改变,延缓COPD进展。
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