论文部分内容阅读
美国香柏(Thuja occidentalis L.)属于柏科(Cupressaceae)崖柏属(Thuja)，又称北美香柏、美国侧柏、黄心柏木等。美国香柏系常绿乔木或灌木，树形优美，树冠整齐，色泽鲜艳可供观赏，园林上常作行状或点状栽植和作绿篱;又由于其抗烟尘和有毒气体的能力很强，故可栽植于工矿产业区;木材呈白色或黄棕色，材质软，纹理粗，极耐用，可供作枕木、桩柱、房屋建筑等;枝叶芳香，富含维生素、黄酮、萜类等多种活性成分，是抗坏血病、抗衰老、预防心脑血管疾病的良药;从枝叶中提取的精油芳香迷人、抑菌驱虫，是高级香水、香油、建筑清洁剂的优质原料;对土壤要求不严，以肥沃的中性土及石灰岩发育的碱性土上生长为佳，抗寒力强，是石灰岩区造林的首选树种之一。可见，美国香柏是园林观赏、用材、药用、造林等作用兼备的优良树种。目前，美国香柏的繁殖主要依靠种子繁殖和硬枝扦插，种子繁殖效率低下，且无法保存优良品系性状，而扦插繁殖研究尚处于起步阶段。利用组织培养技术快速繁殖再生植株，对美国香柏种质资源的保存和提高繁殖效率具有重要意义。本文以Thuja occidentalis L.cv.‘GreenGiant’（简称GT）、‘Little Giant’(简称LT)、‘Rheingold’（简称RD）、‘GoldSpire’（简称GE）四个美国香柏品种为材料，通过单因素实验与正交试验等方法对美国香柏愈伤组织途径与腋芽诱导途径植株再生体系的建立进行了初步研究，对外植体灭菌方法、愈伤组织诱导与增殖、不定芽分化、腋芽诱导与增殖、组培苗生根等实验的因素进行了筛选，主要结果如下: (1)得到最佳茎尖外植体灭菌方法为75％酒精处理30s→无菌水漂洗2次→0.1％升汞溶液处理12min→无菌水漂洗5次，无菌苗获得率为53.33％。 (2) LT、GT、GE、RD四个品种愈伤组织最佳诱导条件分别为LT:MS+1.0mg/L NAA+1.0mg/L6-BA+8.0g/L琼脂+30g/L蔗糖（愈伤诱导率66.67％）;GT: MS+1.0mg/L NAA+1.0mg/L6-BA+8.0g/L琼脂+30g/L蔗糖(愈伤诱导率60.00％);GE:MS+1.0mg/L NAA+0.5mg/L6-BA+8.0g/L琼月旨+30g/L蔗糖（愈伤诱导率46.67％）;RD: MS+2.0mg/L NAA+0.5mg/L或1.0mg/L6-BA+8.0g/L琼脂+30g/L蔗糖（愈伤诱导率20.00％）。 (3)从LT、GT、GE、RD四个品种中筛选出愈伤组织诱导率较高的品种为LT与GT，而RD品种诱导愈伤组织难度最大。 (4) LT与GT品种最佳愈伤组织增殖与继代培养基为MS+1.0mg/LNAA+1.0mg/L6-BA+8.0g/L琼脂+30g/L蔗糖，每瓶接种3.0g(3个样，每个约1.0g)。培养30d后，LT品种增殖倍数为2.24，GT品种增殖倍数为1.96。 (5) LT与GT品种的愈伤组织分不定芽分化最佳培养基皆为1/2MS+0.5mg/L NAA+2.0mg/L6-BA+8.0g/L琼脂+30g/L蔗糖。培养30d后，LT品种不定芽分化率为26.67％，平均分化芽数为2.50; GT品种不定芽分化率为20.00％，平均分化芽数为2.47。 (6) GT品种最佳腋芽诱导培养基配方为MS+1.0mg/L NAA+2.0mg/LKT+0.5mg/L6-BA+8.0g/L琼脂+30g/L蔗糖，腋芽诱导率73.33％，平均诱导芽数5.40。 (7) GT品种最佳腋芽增殖培养基为MS+2.0mg/L NAA+1.0mg/LKT+0.5mg/L6-BA+8.0g/L琼脂+30g/L蔗糖，增殖倍数为2.45。 (8) GT品种最佳试管内诱导生根培养基配方为1/2MS+1.0mg/LKIBA+1.0mg/L NAA+2.0g/L活性炭，生根率60.00％,平均生根数2.11，平均根长4.48cm。 (9)GT品种组培苗试管外（扦插）生根方法为8000mg/L或3000mg/L KIBA处理插穗基部30s，然后扦插到用珍珠岩与泥炭土与原有园土体积比为V（珍珠岩）∶V（泥炭土）∶V（园土）=2∶1∶3的混合基质覆盖6cm的大田中，60d后生根率为48.33％,平均生根数为4.42，平均根长为3.12cm。