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目的：体外研究万古霉素(VAN)分别与左氧氟沙星(LVX)、利福平(RFP)、磷霉素(FOM)联用降低对金黄色葡萄球菌ATCC29213防耐药突变浓度(MPC)的比较。在体外探讨VAN单用及其分别与RFP、FOM联合使用，对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)临床分离株防耐药突变浓度的影响，为指导临床联合应用抗菌药物，制定新的用药策略，防止细菌耐药产生提供理论依据。材料与方法：安徽省细菌耐药性监控中心保存菌株金黄色葡萄球菌质控菌株ATCC29213以及2009-2010年收集的10株无重复分离的MRSA临床分离株。采用琼脂平板二倍稀释法测定金黄色葡萄球菌ATCC29213和10株临床株MRSA对VAN、LVX、RFP及FOM单独用药的最低抑菌浓度(Minimal inhibitoryconcentration，MIC)。琼脂平板稀释法测定单独以及VAN与其他三种药物联用对金黄色葡萄球菌ATCC29213的MPC，先以肉汤法富集浓度为3×1010CFU/ml的金黄色葡萄球菌ATCC29213，取菌液100μl用L棒均匀涂抹在每个含有倍比稀释的抗菌药物MH琼脂平皿上，每个药物浓度接种4个平皿，细菌总量为1.2×l010CFU/ml，72h后无菌落生长的最低药物浓度即为该药的防耐药突变浓度(MPC)。菌落计数法测定和描记细菌恢复生长曲线。应用肉汤法富集浓度为1010CFU/ml细菌，应用上述琼脂平板倍比稀释法测定VAN单用及其分别与RFP、FOM联合使用对10株MRSA临床分离株的防耐药突变浓度，并计算相应的选择指数和耐药频率。结果：VAN、LVX、RFP、FOM单药对金黄色葡萄球菌ATCC29213的MIC分别为1μg/ml、0.125μg/ml、0.008μg/ml和2μg/ml；MPC分别为64μg/ml、2μg/ml、>32μg/ml和64μg/ml，MSW(MPC/MIC)为64、6、>4000和32。联合用药后各自单药的MPC(μg/ml)分别为：VAN+LVX (MPCVAN–4，MPCLVX–0.125)，VAN+RFP(MPCVAN–4，MPCRFP–0.008)，VAN+FOM(MPCVAN-1，MPCFOM-2)。联合LVX和RFP可使VAN的MPC降至原来的1/16倍，联合FOM可使VAN的MPC降至原来的1/64倍。联合4.8μg/ml (8MIC×60%)的VAN可使FOS的MPC降至2μg/ml，缩小MSW为FOM单药的1/32倍；联合28.8μg/ml (16MIC×90%)的FOM可使VAN的MPC降至1μg/ml，缩小MSW为单药VAN的1/64倍。从FOM与1MICVAN联合应用较FOM单用的细菌恢复生长曲线，可以看出其平台期明显缩短。VAN与1MICFOM联合应用较VAN单用的细菌恢复生长曲线，发现其平台期缩短明显。VAN单用对10株MRSA的选择指数为16~64；分别与RFP、FOM联合使用选择指数下降为2~16和1~8，联合用药较单独用药选择指数下降2~32倍，其耐药频率也大幅下降。其差异均有显著性(均P<0.01)。结论：VAN与另三种药物联用，可以明显降低各自单独用药对金黄色葡萄球菌ATCC29213的MPC，其中联合FOM降低其MPC幅度最大，缩小其MSW效果最好。不同浓度FOM与VAN联合用药可以明显降低各自单独用药对金黄色葡萄球菌的MPC，最大幅度可使两药的MPC等于其MIC，因此FOM与VAN联合可以明显缩小甚至关闭各自的MSW，从而预防耐药突变体的产生。VAN分别与RFP和FOM联合使用均可降低其单用对10株MRSA的防耐药突变浓度，缩小耐药突变选择窗。