IL-35对口腔扁平苔藓患者外周血Th17/Treg平衡的影响

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目的:了解口腔扁平苔藓(OLP)患者外周血中Th17/Treg的平衡状况,以及探讨IL-35对OLP患者Th17/Treg平衡的影响。方法:1.OLP患者12例(非糜烂型4例,糜烂型8例)和健康对照13例。无菌提取外周血的单个核细胞(PBMCs),通过流式细胞仪(FCM)分选出CD4+T细胞后,先采用Real-time PCR方法检测Foxp3与RORγt表达情况;然后通过加入/不加入rIL-35在体外进行培养,培养结束后收集培养细胞,采用Real-time PCR方法检测上述相同因子的表达水平。2.OLP患者15例(非糜烂型6例,糜烂型9例)和健康对照14例。无菌提取外周血的单个核细胞(PBMCs),通过流式细胞仪(FCM)分选出CD4+CD25+T细胞,先采用Real-time PCR和ELISA方法分别检测Foxp3、EBI3、p35和IL-10的表达情况;然后通过加入/不加入rIL-35在体外进行培养,培养结束后收集细胞及培养上清,采用Real-time PCR和ELISA方法检测上述相同因子的表达水平。结果:1.(1)OLP患者CD4+T细胞中Foxp3和RORγt mRNA的表达水平均高于正常对照组(p<0.05),在糜烂型OLP组中RORγt/Foxp3 mRNA比值高于非糜烂型OLP组和正常对照组(p<0.05),Spearman相关性分析显示该比值与症状记分呈正相关关系(r=0.661,p=0.019);(2)在健康者CD4+T细胞中,加入rIL-35后Foxp3 mRNA表达下调(p<0.05),RORγt mRNA表达差异不明显(p>0.05),RORγt/Foxp3 mRNA比值在加入rIL-35后上升(p<0.05);(3)在糜烂型OLP组CD4+T细胞中,加入rIL-35后Foxp3 mRNA表达上调(p<0.05),RORγt mRNA表达差异不明显(p>0.05),RORγt/Foxp3 mRNA比值在加入rIL-35后下降(p<0.05),而在非糜烂型OLP组中作用不明显(p>0.05)。2.(1)OLP患者外周血Tregs细胞中Foxp3、EBI3、p35 mRNA和IL-10的表达水平均高于正常对照组(p<0.05);(2)在健康者Tregs细胞中,加入rIL-35后Foxp3 mRNA和IL-10的表达均下调(p<0.05),IL-35的两个亚基EBI3、p35 mRNA在加入rIL-35后表达也降低(p<0.05);(3)而在OLP组Tregs细胞中,加入rIL-35后Foxp3 mRNA和IL-10的表达均上调(p<0.05),IL-35的两个亚基EBI3、p35mRNA在加入rIL-35后表达也升高(p<0.05)。结论:1.在OLP外周血中Th17和Tregs细胞的表达均升高,其都参与了OLP的发病过程,并且存在着以Th17细胞占优势的Th17/Treg失衡,推测该失衡与OLP长期形成的慢性炎症有关。2.外源性IL-35在健康者和OLP患者中影响不同,在健康人群中,其可以下调Tregs细胞的表达,同时也降低了IL-10及IL-35的分泌;而在OLP中则上调了Tregs细胞的表达和促进其分泌IL-10及IL-35,提示外源性IL-35对Th17/Treg平衡具有免疫调节作用,并且推测这种调节的不同也许是OLP发病的原因之一。
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