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背景与目的:
肝细胞癌(hepatocellular carcinoma，HCC)是我国常见的恶性肿瘤之一。尽管其发生发展的机制尚未明了，但已有的研究表明是一个多基因参与多步骤演化过程，其中p53及其通路蛋白p21及MDM2在HCC的发生发展中起重要作用。本项目采用组织芯片(TAM)、免疫组织化学(IHC)及免疫印迹(Western Blot)等技术，研究肝细胞癌组织中p53、p21及MDM2蛋白的表达及其临床病理意义。
材料与方法:
收集中山大学肿瘤防治中心病理科2001-2004年期间有相应临床及随访资料的115例肝细胞癌及其癌旁肝组织石蜡标本，构建肝细胞癌及其癌旁肝组织芯片，用于免疫组织化学实验及临床病理统计。收集中山大学肿瘤防治中心手术切除的4对新鲜肝细胞癌组织及对应的癌旁肝组织，术后立即储存于-80℃冰箱保存，用于抽提蛋白； Western Blot检测p53、 p21及MDM2蛋白在4对肝细胞癌组织及对应癌旁肝组织中的表达水平。免疫组织化学方法检测p53、p21及MDM2蛋白在115例肝细胞癌及其癌旁肝组织中的表达，并采用SPSS13.0统计软件包进行分析上述分子标记物的表达与肝细胞癌临床病理特征(性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤数量、HBsAg、病理分级和血清AFP浓度) 和患者预后的关系。
结果:
1．p53、p21及MDM2蛋白在肝细胞癌组织中呈高表达
1.1 免疫印迹结果显示：p53、p21及MDM2蛋白在肝细胞癌组织中呈高表达，明显高于对应的癌旁肝组织。
1.2 免疫组织化学结果显示：p53、p21及MDM2在肝细胞癌中的阳性表达率分别为83.5﹪(96/115)、36.5﹪(42/115)和 48.7﹪(56/115)；p53、p21及MDM2在癌旁肝组织中的阳性表达率分别为22.9﹪(25/109)、15.2﹪(17/112)和31.9﹪(36/113)；肝细胞癌组织中p53、p21及MDM2的阳性表达率均高于对应的癌旁肝组织(P<0.05)
2．p53、p21及MDM2蛋白在肝细胞癌组织中的表达具有相关性
2.1 115例肝细胞癌组织中p53与p21表达之间有统计学关联，相关系数(R)为0.192，(x<2>=4.220，P<0.05)。
2.2 p53与MDM2表达之间有统计学关联，相关系数(R)为0.340，(x<2>=13.273，P<0.05)。
2.3 p21与MDM2表达之间不存在统计学关联(x<2>=1.890，P>0.05)。
3．p53、p21及MDM2蛋白在肝细胞癌组织中的表达与临床病理参数(患者性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤数量、HBsAg、病理分级和血清AFP浓度)无统计学关联
3.1 115例肝细胞癌组织中p53的阳性表达与性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤数量、HBsAg、病理分级和血清AFP浓度均无统计学关系(均为P>0.05)。
3.2 p21的阳性表达与性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤数量、HBsAg、病理分级和血清AFP浓度均无统计学关系(均为P>0.05)。
3.3 MDM2的阳性表达与性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤数量、HBsAg、病理分级和血清AFP浓度均无统计学关系(均为P>0.05)。
4．p53、p21及MDM2蛋白在肝细胞癌中的阳性表达与肝细胞癌患者生存预后无关联 p53、p21和MDM2蛋白的阳性表达与35例肝细胞癌患者生存时间之间均无统计学关联(p53：x<2>=1.270，P=0.260；p21：x<2>=0.040，P=0.841；MDM2：x<2>=0.000，P=0.956)。
结论:
1．p53、p21及MDM2蛋白在肝细胞癌组织中呈高表达，且高于其在癌旁肝组织的表达，提示它们可能在肝细胞癌的发生发展中发挥重要的作用。
2．p53在肝细胞癌组织中的表达与p21及MDM2表达具有相关性。
3．p53、p21和MDM2蛋白的阳性表达与患者性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤数量、HBsAg、病理分级、血清AFP浓度及生存时间均无统计学关系。