miR-342通过靶向LGR5调控Wnt/β-catenin信号通路并影响结肠癌干性

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目的:探讨miR-342对结肠癌干性的影响。  方法:我们分析结肠癌数据库中 miR-342在结肠癌组织中的表达以及对结肠癌患者预后的影响。然后用过表达miR-342的LOVO细胞系和抑制miR-342表达的HCT116细胞系做细胞成球、软琼脂集落形成等实验探究miR-342对结肠癌细胞干性的影响。为了探究miR-342对Wnt/catenin信号通路的影响,接着我们又进行了TOP/FOP Flash实验,并且WB和RT-PCR实验检测miR-342过表达或抑制后结肠癌细胞β-catenin及其下游基因改变。在用网站预测miR-342的靶基因后,我们构建了带有荧光素酶标签的LGR53’UTR质粒验证miR-342是否可以靶向LGR5。此外,还用PGE2刺激HCT116细胞探究PGE2对miR-342的调控。  结果:miR-342在结肠癌组织中低表达并影响结肠癌的5年生存率和5年无病生存率。miR-342可以抑制结肠癌细胞的成球和SOX2、Nanog等干性基因的表达。LGR5是miR-342的靶基因,miR-342还可以通过靶向 LGR53’UTR抑制Wnt信号通路及下游干性基因 Ascl2、C-myc等。PGE2刺激 HCT116细胞可上调DNMT1并抑制miR-342的表达。  结论:miR-342可以直接靶向LGR53’UTR抑制Wnt/β-catenin并抑制结肠癌细胞干性。而PGE2可以上调DNMT1抑制miR-342的表达。
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