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目的：采用免疫组织化学方法在结直肠息肉，腺瘤，腺癌渐变过程中检测出有重要意义的分子标记，并通过跨胎盘RNAi技术干扰其在子一代小鼠的表达，构建BMP息肉小鼠模型,初步证实BMP、TLR3、TLR4在结直肠息肉发生、发展、恶变的机制中有重要作用。方法：1）应用免疫组织化学方法（sP法）检测MBP2,TLR4, TLR3,COX2在儿童结直肠幼年性息肉，儿童结直肠错构瘤样息肉，成人结直肠炎性息肉，结直肠腺瘤，结直肠腺癌组织中的表达情况；2）将孕鼠随机分Ringer’s液空白对照组（空白组）、pSES阴性对照组（阴性组）、pSES-SiBMP4实验组（实验组），采用跨胎盘RNAi技术，在孕鼠的尾静脉注射沉默BMP4基因的质粒，通过跨胎盘RNAi干扰子一代小鼠的BMP4的表达，分别于出生1周，8周，10周处死子代小鼠，解剖观察子一代小鼠的结直肠肠道息肉位置及数量情况。结果：一、免疫组织化学结果：1．BMP2在腺体组织中呈现弥漫均一细胞浆的棕黄色颗粒的表达，在儿童幼年性息肉组（OD68.65±18.15）,儿童错构瘤样息肉组（OD34.8±18），成人炎性息肉组（OD42.9±10.24），结直肠腺瘤组(OD50.3±10.2)中的表达明显高于结肠腺癌组(OD19.1±5.3)，在结肠腺癌组中明显降低的表达确有显著差异（p<0.05）。2. TLR4的表达情况：1）儿童幼年性息肉组（OD4.05±1.36）与儿童错构瘤样息肉组之间的表达有显著差异性（p<0.05）；儿童幼年性息肉组与结直肠腺癌组中的表达有显著差异性（p<0.05）。2）儿童错构瘤样息肉组(OD29.5±11)和结直肠腺瘤组的表达之间有显著差异（p<0.05）。3）结直肠腺瘤组（OD16.2±6.5）的表达与结直肠腺癌组(OD47.6±11.5)之间的表达有显著差异（p<0.05）。3. TLR3在儿童幼年性息肉组（OD270±90.42），儿童错构瘤样息肉组(OD191.3±47)，结直肠腺瘤组(OD147.1±58)，结直肠腺癌组(OD94.9±39.8)中的表达呈逐步下降趋势，在结直肠腺癌组中明显降低的趋势在相互比较中有显著差异（p<0.05）。4.COX2的表达主要是弥散的表达在腺上皮的细胞胞浆和细胞核膜上，在儿童幼年性息肉组(OD60.7±20.7)，儿童错结肠腺瘤组(OD69.1±31.5)，结直肠腺瘤组(OD53.8±16.4)，结肠腺癌组(OD60.5±20.4)中的表达均高于成人结直肠息肉组(OD12.65+4.21)，但相互比较无显著差异（p>0.05）。二、BMP息肉小鼠模型特点：1．运用RT-PCR,蛋白印迹法检测子一代小鼠结肠粘膜的BMP4的表达均较同周龄正常对照组显著降低；2.在出生后1周未见确切息肉样组织形成，第8周时可见包块样突起，经HE染色可见腺体上皮增生，病理证实为息肉形成，第10周包块突起明显，数量较8周增多，HE染色同样证实为结直肠息肉形成，未见腺瘤及腺癌样改变。结论：1）通过免疫组织化学的方法，证明在结直肠息肉，腺瘤，腺癌的渐变过程中有意义的三种分子标记：BMP缺失影响肠道的腺上皮的分化和增殖过程，导致结直肠息肉，腺瘤，腺癌的渐变过程；TLR3的低表达可能预示息肉恶变的高倾向；TLR4是结直肠息肉，腺瘤，腺癌的渐变过程的重要分子标记。2）通过跨胎盘RNAi技术首次成功构建了BMP息肉小鼠模型，为研究结直肠息肉发生、发展及恶变的机制奠定了实验室基础。通过本实验初步证实BMP,TLR3，TLR4参与了结直肠息肉的发生、发展和恶变机制。目的：通过免疫组织化学的方法检测结直肠息肉，结直肠腺瘤，结直肠腺癌中不同分子标记的表达情况，为结直肠息肉，结直肠腺瘤，结直肠腺癌的渐变过程找到有意义的分子标记物。方法：应用免疫组织化学方法（sP）法检测MBP2、TLR3、TLR4、COX2在儿童结直肠幼年性息肉，儿童结直肠错构瘤样息肉，成人结直肠炎性息肉，结直肠腺瘤，结直肠腺癌组织中的表达情况。结果：1．BMP2在腺体组织中呈现弥漫均一细胞浆的棕黄色颗粒的表达，在儿童幼年性息肉组（OD68.65±18.15）,儿童错构瘤样息肉组（OD34.8±18），成人炎性息肉组（OD42.9±10.24），结直肠腺瘤组(OD50.3±10.2)中的表达明显高于结肠腺癌组(OD19.1±5.3)，在结肠腺癌组中明显降低的表达确有显著差异（p<0.05）。2. TLR4的表达情况：1）儿童幼年性息肉组（OD4.05±1.36）与儿童错构瘤样息肉组之间的表达有显著差异性（p<0.05）；儿童幼年性息肉组和结肠腺瘤组之间的表达无显著差异（p>0.05）；儿童幼年性息肉组与结直肠腺癌组中的表达有显著差异性（p<0.05）。2）儿童错构瘤样息肉组(OD29.5±11)和结直肠腺瘤组的表达之间有显著差异（p<0.05）；儿童错构瘤样息肉组与结直肠腺癌组的表达之间无显著差异（p>0.05）。3）结直肠腺瘤组（OD16.2±6.5）的表达与结直肠腺癌组(OD47.6±11.5)之间的表达有显著差异（p<0.05）。3. TLR3在儿童幼年性息肉组（OD270±90.42），儿童错构瘤样息肉组(OD191.3±47)，结直肠腺瘤组(OD147.1±58)呈逐步下降趋势，在分别与结直肠腺癌组(OD94.9±39.8)的比较中有显著差异（p<0.05）。4.COX2的表达主要是弥散的表达在腺上皮的细胞胞浆和细胞核膜上，在儿童幼年性息肉组(OD60.7±20.7)，儿童错结肠腺瘤组(OD69.1±31.5)，结直肠腺瘤组(OD53.8±16.4)，结肠腺癌组(OD60.5±20.4)中的表达均高于成人结直肠息肉组(OD12.65+4.21)，但相互比较无显著差异（p>0.05）。结论：在结直肠息肉，结直肠腺瘤，结直肠腺癌的渐变过程中，BMP的缺失影响肠道的腺上皮的分化和增殖过程，导致结直肠息肉形成，甚至恶变；TLR3的低表达可能预示息肉恶变高倾向；TLR4是结直肠息肉，腺瘤，腺癌的渐变过程的重要分子标记。目的：采用跨胎盘RNAi的方法沉默孕鼠的BMP4，导致子一代小鼠结直肠多发性息肉形成从而建立BMP结肠息肉小鼠模型，证明BMP参与小鼠结直肠息肉发生机制。方法：将孕鼠随机分Ringer’s液空白对照组（空白组）、pSES阴性对照组（阴性组）、pSES-SiBMP4实验组（实验组），采用跨胎盘RNAi技术，在孕鼠的尾静脉注射沉默BMP4基因的质粒，通过跨胎盘作用干扰子一代小鼠的BMP4的表达，分别于出生1周，8周，10周处死子代小鼠，解剖观察子一代小鼠的结直肠的息肉位置及数量。结果：1．运用RT-PCR，蛋白印迹法检测子一代小鼠的结直肠BMP4的表达均较正常同龄对照组显著降低；2.在出生后第1周未见确切息肉样组织形成，第8周时可见包块样突起，经HE染色可见腺体上皮增生病理证实为息肉形成，第10周包块突起明显，数量较第8周增多，HE染色同样证实为结直肠息肉形成，未见腺瘤及腺癌样改变。结论：1.首次成功建立了BMP结直肠息肉小鼠模型，证明BMP参与了结直肠息肉形成机制。2.跨胎盘RNAi技术在干扰基因表达方面有广阔的应用前景，值得进一步推广和完善。