超氧化物歧化酶在人胸主动脉夹层和胸主动脉瘤中表达的初步研究

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目的:1.鉴定超氧化物岐化酶(superoxide dismutase, SOD)各亚型在人胸主动脉夹层、胸主动脉瘤和正常的主动脉中膜组织中的表达情况;2.检测超氧化物岐化酶各亚型在病变及正常主动脉壁中的定位及病变主动脉的病理学改变;3.初步探讨超氧化物岐化酶各亚型在人胸主动脉夹层和胸主动脉瘤疾病中可能发挥的作用。方法:以2006年1月至2008年12月在第二军医大学附属长海医院接受外科手术的胸主动脉夹层和胸主动脉瘤患者各15例以及同期器官移植供者12例为研究对象,分为胸主动脉夹层组(TAD组)、胸主动脉瘤组(TAA组)和正常对照组(NA组),所有研究对象获取病变或相应部位主动脉组织,液氮冻存新鲜组织以蛋白质印迹法(western blotting, WB)分别检测SOD的三个亚型SOD-1、SOD-2、SOD-3在各组标本中的表达差异;石蜡包埋组织以免疫组织化学法(immunohistochemistry,IHC)检测SOD各亚型在各组标本主动脉壁中的表达、定位及主动脉壁的病理改变。数据运用SPSS 17.0软件进行统计学分析。蛋白质印迹结果采用方差齐性检验(F检验)和两组独立样本t检验(t-test)。免疫组化结果采用Wilcoxon秩和检验,均以P<0.05为差异有统计学意义。结果:1.蛋白质印迹显示:TAD组和TAA组的SOD-1和SOD-3表达量均显著低于NA组(P<0.05),TAD组与TAA组无显著差异(P>0.05); TAD组的SOD-2表达量与NA组无显著差异(P>0.05), TAA组的SOD-2表达量显著低于NA组和TAD组(P<0.05)。2.免疫组织化学显示:各亚型SOD在三组标本中均有表达,SOD-1和SOD-2主要定位于主动脉中膜血管平滑肌细胞内及中外膜滋养血管内,SOD-3主要表达于血管壁中外膜细胞外基质中。NA组主动脉壁中膜血管平滑肌细胞密度正常,排列有序,未见明显的中膜退行性变,中外膜可见丰富的滋养血管,无明显炎症反应,SOD染色均匀,染色强度为阳性至强阳性;TAD组标本中膜血管平滑肌细胞密度降低,排列紊乱,中膜夹层撕开处边缘有一条SOD阴性染色条带,该条带内的细胞核明显减少,周围SOD染色较正常组减弱,中外膜可见炎症细胞浸润;TAA组标本中膜血管平滑肌细胞排列紊乱,中膜平滑肌细胞密度明显降低,SOD染色减低,中外膜炎症反应不明显,滋养血管较少。各亚型SOD的含量变化与蛋白质印迹法测得结果一致。结论:1.SOD-1主要定位于主动脉中膜血管平滑肌细胞内及中外膜滋养血管内,其在TAD组和TAA组的表达量显著低于NA组。2.SOD-2亦主要表达于主动脉中膜血管平滑肌细胞内及中外膜滋养血管内,其在TAA组的表达量显著低于NA组和TAD组,TAD组的SOD-2表达量与NA组无显著差异。3.SOD-3主要表达于血管壁中外膜细胞外基质中,其含量在三组标本中的变化趋势与SOD-1相同。4.胸主动脉夹层(TAD)和胸主动脉瘤(TAA)均为主动脉中膜组织的退行性病变,在TAD组标本中,中膜夹层撕开处边缘有一条SOD阴性染色条带,该条带内的细胞核明显减少,中外膜可见炎症细胞浸润;在TAA组标本中,中膜平滑肌细胞密度明显降低,SOD染色减低,中外膜炎症反应不明显,滋养血管较少。
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